早期宮頸癌淋巴管新生與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性研究.pdf

1、目的： 宮頸癌是女性最常見的婦科惡性腫瘤，淋巴轉(zhuǎn)移是導(dǎo)致宮頸癌治療失敗和死亡的主要原因。本課題研究早期宮頸癌淋巴管新生與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性，尋找預(yù)測宮頸癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵指標(biāo)，為抑制宮頸癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、提高宮頸癌療效提供治療新靶點。 方法： (1)采用透射電鏡和光學(xué)鏡觀測宮頸癌內(nèi)、癌旁、正常區(qū)域以及淋巴結(jié)周圍微小淋巴管的分布和形態(tài)特征，分析不同部位淋巴管新生、淋巴管面積、淋巴管侵犯以及淋巴內(nèi)皮細(xì)胞間的開放連接與富頸

2、癌前哨淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系。 (2)采用免疫組織化學(xué)(IHC)和逆轉(zhuǎn)錄聚合酶連反應(yīng)(RT-PCR)技術(shù)檢測宮頸癌內(nèi)、癌旁、正常區(qū)、前哨淋巴結(jié)及非前哨無轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)組織中VEGF-C/D的表達(dá)，分析VEGF-C/D的表達(dá)與宮頸癌淋巴管新生、淋巴管侵犯以及與前哨淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系，探討癌旁區(qū)淋巴管新生、淋巴管侵犯以及前哨淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移機(jī)制。 (3)分析癌旁區(qū)LVI、SLN檢測以及二者聯(lián)合應(yīng)用對宮頸癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的預(yù)測價值。 結(jié)果：

3、 (l)宮頸癌組織淋巴管的分布與形態(tài)特征：宮頸癌組織內(nèi)可見極少數(shù)塌陷的淋巴管，無法計數(shù)；癌旁區(qū)淋巴管密度顯著高于正常區(qū)淋巴管密度(p=0.000)：癌旁區(qū)淋巴管總面積顯著低于正常區(qū)淋巴管總面積(p=0.002)。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組癌旁區(qū)淋巴管密度和總面積均顯著高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組(p=0.000，p=0.037)。癌旁區(qū)可見腫瘤細(xì)胞侵入淋巴管內(nèi)，正常區(qū)無淋巴管侵犯。 (2)宮頸癌旁區(qū)淋巴管侵犯與前哨淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系：宮頸癌癌旁區(qū)

4、淋巴管侵犯35.29％(18/51)，其中前哨淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性者16例，HE、IHC分別檢出前哨淋巴結(jié)陽性例數(shù)為13例、14例。前哨淋巴結(jié)采用HE、IHC檢測方法預(yù)測宮頸癌前哨淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的準(zhǔn)確率分別為94％(47/50)、96％(48/50)，假陰性率分別為18.75％(3/16)、12.50％(2/16)。宮頸癌癌旁區(qū)淋巴管侵犯與宮頸癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有一致性(McNemarTest p=0.500)。陽性預(yù)測值為83.33％(15/18)

5、，陰性預(yù)測值為93,93％(31/33)，準(zhǔn)確率為90.19％(46/51)。 (3) VEGF-C蛋白在宮頸癌組織中的表達(dá)及臨床意義：VEGF-C蛋白在宮頸癌組織中的陽性表達(dá)率70.59％(36/51)，癌旁區(qū)陽性表達(dá)率68.63％(35/51)；17例轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)(其中前哨轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)16例)陽性表達(dá)率94.12％(16/17)。宮頸正常組織和非前哨無轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)均無表達(dá)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義p=0.000)。VEGF-C陽性表達(dá)組淋

6、巴結(jié)轉(zhuǎn)移率44.44％(16/36)高于VEGF-C陰性表達(dá)組6.67％(1/15)； VEGF-C陽性表達(dá)組宮頸癌浸潤深度>1/2者77.78％(28/36)，高于VEGF-C陰性表達(dá)組13.33％(2/15)； VEGF—C陽性表達(dá)組宮頸癌淋巴管侵犯44.44％(16/36)，高于VEGF-C陰性表達(dá)組6.67％(1/15)；VEGF-C陽性表達(dá)組宮頸癌Ⅱ期患者47.22％(17/36)，高于VEGF-C陰性表達(dá)組Ⅱ期宮頸癌患者13

7、.33％(2/15)(p均<0.05)； VEGF-C陽性組宮頸癌癌旁區(qū)淋巴管密度和總面積均高于VEGF-C陰性組(p<0.05)。 (4)VEGF-D蛋白在宮頸癌組織中的表達(dá)及臨床意義：宮頸癌組織中VEGF～D蛋白陽性表達(dá)率60.78％(31/51)，癌旁區(qū)陽性表達(dá)率56.86％(29/51)；17例轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)(其中前哨轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)16例)VEGF-D蛋白陽性表達(dá)率82.35％(14/17)。宮頸癌正常組織和非前哨無轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)均

8、無表達(dá)，VEGF-D蛋白在宮頸癌組織中、癌旁、前哨轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)的陽性表達(dá)高于宮頸癌正常組織和非前哨無轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)的表達(dá)(p=0.000； p=0.000；p=0.000)。VEGF-D陽性表達(dá)組淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率51.61％(16/31)，高于VEGF-D陰性表達(dá)組3.33％(1/30)； VEGF-D陽性表達(dá)組LVI的發(fā)生率48.39％(15/31)，高于VEGF-D陰性表達(dá)組10％(3/30)(p<0.05)。 (5) VEGF.C/

9、DmRNA的表達(dá)：熒光定量RT-PCR檢測VEGF-C mRNA在宮頸癌內(nèi)、癌旁、前哨轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中的表達(dá)顯著高于宮頸正常組織和非前哨無轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)(P<0.01)。VEGF-C mRNA在前哨轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中的表達(dá)顯著高于宮頸癌內(nèi)和癌旁組織(P<0.05)。VEGF-D mRNA在宮頸癌內(nèi)、癌旁、前哨轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中的表達(dá)顯著高于宮頸正常組織(P<0.01)和非前哨無轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)(P<0.05)。VEGF-D mRNA在前哨轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中的表達(dá)顯著高

10、于宮頸癌內(nèi)(P<0.05)，與宮頸癌旁組織比較無顯著差異(P>0.05)。VEGF-C/DmRNA在宮頸癌組織中的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、淋巴管侵犯、腫瘤浸潤深度方面均有顯著性差異(p均<0.05)。 (6)核素+染料法檢測SLN成功率98.040/0(50/51)；全部檢測SLN141個，均經(jīng)HE、IHC檢測，HE染色檢測陽性淋巴結(jié)35個(24.82％)，IHC檢出陽性淋巴結(jié)42個(29.79％)，HE與IHC之間檢出率的差異無統(tǒng)計

11、學(xué)意義(p=0.283)。 (7)癌旁區(qū)淋巴管侵犯陽性18例，其中15例前哨淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性。淋巴管侵犯-IHC預(yù)測宮頸癌前哨淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)的敏感度為93.75％(15/16)，特異度為90.32％(28/31)，準(zhǔn)確率為98％(49/50)，假陰性率為6.25％(1/16)。聯(lián)合淋巴管侵犯-IHC和SLN檢測預(yù)測宮頸癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移敏感度100％(16/16)，準(zhǔn)確率100％(50/50)，假陰性率0％(0/16)。 (8)

12、宮頸癌不同臨床分期對SLN的影響：全組SLN檢測失敗1例。Ib1期診斷準(zhǔn)確率100％(25/25)，Ib2期診斷準(zhǔn)確率100％(7/7)，IIa期診斷準(zhǔn)確率88.89％(16/18)，假陰性率16.67％(2/12)。 結(jié)論： (1)宮頸癌淋巴管新生發(fā)生于癌旁區(qū)，新生淋巴管管腔小，腫瘤細(xì)胞通過淋巴管壁的內(nèi)皮細(xì)胞開放連接和破壞癌旁區(qū)淋巴管進(jìn)入淋巴引流，可能是宮頸癌形成淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的兩種主要方式；癌旁區(qū)LVI-IHC有可能成為

13、準(zhǔn)確預(yù)測淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的敏感指標(biāo)。 (2) VEGF-C、D在宮頸癌組織中都表達(dá)上調(diào)，且有一定的協(xié)同性，它們可能參與了宮頸癌發(fā)生、發(fā)展的過程，在宮頸癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中起重要作用；VEGF-C、D既可以誘導(dǎo)宮頸癌癌旁區(qū)淋巴管新生又可以促使淋巴管侵犯、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移增加。VEGF-C、D有可能成為預(yù)測宮頸癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵指標(biāo)，并可能成為抑制宮頸癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、提高宮頸癌療效的治療靶點。 (3)對Ib期宮頸癌聯(lián)合應(yīng)用LVI-IHC和前哨