葡萄籽提取物對(duì)慢性砷暴露致大鼠肝損傷的保護(hù)作用.pdf

1、背景與目的:
　　 砷是一種環(huán)境毒物和人體致癌物，在自然環(huán)境中廣泛分布。包括我國在內(nèi)，全球有70個(gè)國家和地區(qū)的人們?cè)谑苌槲廴镜叵滤挠绊懀陨橹卸疽殉蔀橐粋€(gè)全球性的公共衛(wèi)生問題。砷能夠在肝臟中蓄積，砷中毒患者往往伴有一定程度的肝損傷。雖然砷與肝損傷之間的關(guān)系已經(jīng)確定，但其具體機(jī)制仍不明確，目前公認(rèn)的是氧化損傷學(xué)說。還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（nicotinamideadeninedinucleotidephosphate，

2、NADPH）氧化酶是一種由蛋白質(zhì)亞基組成的復(fù)合物，當(dāng)受到有害因子的刺激時(shí)它能產(chǎn)生大量的活性氧(reactiveoxygenspecies，ROS)。過量生成的ROS激活促炎性和促纖維化因子，造成包括DNA、蛋白質(zhì)和脂類在內(nèi)的細(xì)胞大分子的氧化損傷，出現(xiàn)肝毒性作用。因此，清除ROS，減輕氧化應(yīng)激可能會(huì)減輕砷暴露引起的肝損傷。葡萄籽提取物(grapeseedextract，GSE)富含多酚類物質(zhì)，在體內(nèi)能夠直接清除ROS，其抗氧化能力強(qiáng)于維生

3、素C、維生素E以及β胡蘿卜素。本次研究的目的是觀察無急性毒性作用劑量的砷所造成的肝損傷，以及GSE對(duì)肝氧化損傷的保護(hù)作用，探討砷致肝損傷的作用機(jī)制，為治療肝損傷提供理論依據(jù)。
　　 方法:
　　 在前期建立動(dòng)物模型的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和文獻(xiàn)報(bào)道的基礎(chǔ)上，進(jìn)行如下分組:將40只健康雄性SD大鼠隨機(jī)分為4組，每組10只，即正常對(duì)照組，每日只飲純水;砷暴露組，每日飲含亞砷酸鈉(NaAsO2)30mg/L的水溶液;GSE干預(yù)組，以100m

4、g/kg的劑量隔日灌胃;GSE與砷暴露聯(lián)合干預(yù)組，每日飲含亞砷酸鈉(NaAsO2)30mg/L的水溶液并以GSE100mg/kg的劑量隔日灌胃。12個(gè)月實(shí)驗(yàn)期結(jié)束，末次染毒后次日，大鼠稱重，然后乙醚麻醉，抽取心臟血，制備血清樣本，檢測(cè)谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)和白蛋白的活性，作肝功能分析;切除肝臟，計(jì)算肝臟系數(shù);制備肝組織樣本，檢測(cè)谷胱甘肽(glutathione，GSH)、谷胱甘肽過氧化物酶(glutathionepe

5、roxidase，GSH-Px)、超氧化物歧化酶(superoxidedismutase，SOD)的活性、檢測(cè)組織ROS的水平以及脂質(zhì)過氧化水平;運(yùn)用WesternBlot方法檢測(cè)各組中NADPH氧化酶亞基Nox2、Nox4和p47phox蛋白表達(dá)水平。采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS12.0，對(duì)所得數(shù)據(jù)采用單因素方差分析，各組間的比較采用SNK-q檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)定為0.05。
　　 結(jié)果:
　　 與對(duì)照組相比，砷暴露組的肝臟系數(shù)升

6、高(q=18.91，P＜0.05);ALT和AST水平升高，白蛋白水平降低（q值分別為43.61，27.13，12.52，P均＜0.05），肝功能明顯受損;GSH、SOD和GSH-Px的活性降低（q值分別為91.96，75.24，39.88，P均＜0.05），組織中ROS與MDA水平升高（q值分別為36.79，47.53，P均＜0.05）;NADPH氧化酶亞基Nox2、Nox4、p47phox蛋白表達(dá)水平升高;而與砷暴露組相比，GSE聯(lián)