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文檔簡介
1、本文對黑曲霉WP1植酸酶基因的克隆及在畢赤酵母中的表達(dá)進(jìn)行了探討。本研究根據(jù)已發(fā)表的植酸酶基因全序列設(shè)計(jì)2對引物,用PCR方法從黑曲霉WP1總DNA中擴(kuò)增到約1.4 kb和1.5 kb的phyA和phyB基因片段,對2個(gè)基因片段進(jìn)行了克隆及序列測定。測序結(jié)果表明:phyAl基因長1347 bp,共編碼448個(gè)氨基酸,有11個(gè)潛在的N-糖基化位點(diǎn),含有植酸酶活性位點(diǎn)“RHGXRYP”和“HD”,該基因已在GenBank注冊,注冊號為:DQ
2、815852。phyA<,1>基因與產(chǎn)植酸酶酶活最高的天然黑曲霉標(biāo)準(zhǔn)菌株NRRL3135(Accession:M94550)氨基酸序列比較,同源性達(dá)97.77%,因此命名為pgtA<,1>。phyB<,1>基因長1560 bp,含有3段內(nèi)含子,共編碼460個(gè)氨基酸,含有植酸酶保守序列“RHGXRXP”和“HD”,與已報(bào)導(dǎo)的ALKO243的植酸酶aph基因(GenBank Accession:L02420)相比較,編碼的氨基酸序列同源性為
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