膽管上皮細胞上皮-間質轉變以及BMP-7的逆轉效應.pdf

1、目的：膽管上皮細胞(Biliary Epithelial Cells，BECs)是一族高氧耗、高代謝、低缺氧耐受、易受自由基損害的細胞群體。缺血性膽管病時膽管上皮損傷后的共同特征是上皮化的功能單位發(fā)生改建和纖維化，伴有上皮細胞缺失、基底膜損害和間質纖維化。但膽管上皮細胞同膽管型纖維化之間的關系尚不清楚。本研究通過體外原代培養(yǎng)大鼠及人膽管上皮細胞(BECs)，探討經轉化生長因子-β(TGF-β)誘導后，BECs能否出現(xiàn)上皮.間質表型轉變(

2、EMT)，及其相關蛋白及分子標志的表達變化；并探討骨形態(tài)形成蛋白-7(BMP-7)是否可以逆轉膽管上皮細胞的EMT，從而為缺血性膽管病的發(fā)生機理及治療提供實驗依據。
　　 方法：分離大鼠及人肝膽管上皮細胞并進行原代培養(yǎng)。對2種細胞分別設立未處理空白對照組、誘導EMT組、BMP-7對EMT逆轉效應組。通過免疫組化、免疫熒光檢測其E-cadherin、CK-19、S100A4、β-catenin、Fibronectin等標志蛋白的表

3、達變化。
　　 結果：(1)進行了體外分離大鼠及人膽管上皮細胞并進行原代培養(yǎng)，細胞純度及存活率較高；(2)體外培養(yǎng)的膽管上皮細胞經TGF-β誘導后，其上皮標志E-cadherin、β-catenin、CK-19表達降低，間質細胞標志Vimentin、S100A4及Fibronectin的表達升高，出現(xiàn)EMT的特征；(3)BMP-7可在一定程度上逆轉EMT，表現(xiàn)為E-cadherin、β-catenin及CK-19表達升高，而Vi