匹羅卡口癲癇小鼠海馬DISC1、PDE4的表達(dá).pdf

1、目的:研究精神分裂癥斷裂基因1(Disrupted-in-Schizophrenia1，DISC1)蛋白、磷酸二酯酶4(Phosphodiesterase4，PDE4)及其mRNA在匹羅卡品致癲癇小鼠海馬中的表達(dá)變化，探討其在癲癇發(fā)病過程中的作用。
　　 方法:1.將雄性C57BL/6(3～4周)小鼠(246例)隨機(jī)分配入實(shí)驗(yàn)組(198例)和對照組(48例)，實(shí)驗(yàn)組采用匹羅卡品小劑量給藥方法建立癲癇小鼠模型。
　　 2.

2、采用免疫組化和Real-Time PCR定性、定量分析方法分別于癲癇持續(xù)狀態(tài)(Status epilepticus，SE)后3天，7天，14天，28天檢測實(shí)驗(yàn)組和對照組小鼠海馬組織中DISC1、PDE4、PDE4B(phosphodiesterase4B磷酸二酯酶4B)和MCM2(Minichromosomemaintenance protein2微小染色體維持蛋白2)的表達(dá)改變。
　　 結(jié)果:1.DISC1免疫組化陽性著色主要

3、位于海馬神經(jīng)元細(xì)胞的胞漿和胞核。DISC1蛋白和mRNA的表達(dá)水平在對照組各時間點(diǎn)無明顯差異(P＞0.05)。與對照組相比:DISC1的表達(dá)水平在實(shí)驗(yàn)組SE后3天無顯著性差異(P＞0.05);而自第7天開始，實(shí)驗(yàn)組各時間點(diǎn)的表達(dá)顯著低于對照組(P＜0.05);且隨著時間的增加呈現(xiàn)逐漸下降的趨勢。
　　 2.PDE4和PDE4B免疫組化陽性著色主要位于海馬神經(jīng)元細(xì)胞的細(xì)胞膜和細(xì)胞漿。PDE4B蛋白、mRNA和PDE4蛋白的表達(dá)水平

4、在對照組各時間點(diǎn)無明顯差異(P＞0.05)。與對照組相比:PDE4和PDE4B的表達(dá)水平在實(shí)驗(yàn)組SE后3天、7天無顯著性差異(P＞0.05);在14天明顯低于對照組(P＜0.05);在28天明顯高于對照(P＜0.05);呈現(xiàn)先下降后上升的趨勢。且發(fā)現(xiàn)在早期(＜14天)PDE4和DISC1的表達(dá)水平具有顯著相關(guān)性(P＜0.01)。
　　 3.對照組小鼠齒狀回MCM2+細(xì)胞數(shù)目和MCM2 mRNA各時間點(diǎn)存在顯著差異(P＜0.05)

5、，隨著時間增加，MCM2表達(dá)水平下降。與對照組相比:實(shí)驗(yàn)組小鼠MCM2表達(dá)水平在SE后各時間點(diǎn)顯著上升(P＜0.05)，且隨著SE后時間增加，增殖比例呈現(xiàn)上升趨勢。且發(fā)現(xiàn)在3天、7天、14天、28天MCM2和DISC1的表達(dá)水平呈現(xiàn)顯著相關(guān)(P＜0.01)。
　　 結(jié)論:1.DISC1可能通過介導(dǎo)癲癇后新生神經(jīng)細(xì)胞增生參與癲癇發(fā)生過程。
　　 2.PDE4和PDE4B可能通過與DISC1作用影響神經(jīng)干細(xì)胞增生參與癲癇初期