應用分子生物學技術探討蛋白激酶C信號途徑在低氧性肺動脈高壓發(fā)病機制中的作用.pdf

1、該研究在以往工作的基礎上采用組織及細胞原位雜交、斑點雜交、RT-PCR、免疫組化等分子生物學技術及四甲基偶氮唑鹽(MTT)微量比色法,通過低氧大鼠動物模型及細胞培養(yǎng)等方法,進一步觀察PKCα在不同低氧時間在體和離體PA SMC和肺動脈內皮細胞PAEC中mRNA表達水平的變化,并觀察PKC對肺動脈平滑肌細胞增殖、凋亡、結構型一氧化氮合酶(cNOS)和ET-1 mRNA表達的影響,以從整體、細胞和分子水平進一步探討PKC在HPH的發(fā)病機制中

2、的作用;此外我們還觀察了燈盞花素和銀杏葉制劑對HPH的治療作用及對低氧PA SMC中PKCα mRAN表達的影響,以評價其作用機制及應用價值,為HPH的治療尋找新的更為有效治療藥物.結論:1.低氧可促進在體和離體培養(yǎng)的PA SMC和PAEC中PKCαmRNA的表達,尤以腺泡內PA SMC的變化最明顯;PCK可促進正常和低氧PA SMC的增殖、抑制細胞凋亡,PKC信號傳導通道在HPH的形成機制中起重要作用,可能通過調控PA SMC的增殖與

3、凋亡、血管的重塑及血管張力而參與了肺動脈高壓的形成,其中PKCα可能起較為關鍵的作用.2.PKC在HPH的形成機制中的作用可能是通過抑制cNOS mRNA和增加ET-1 mRAN在PA SMC和PAEC的表達來對NO和ET-1的調控來實現(xiàn)的,PKC信號通道可能作用在NO和ET-1的上游,但其機制還有待于進一步的研究.3.燈盞花素有明顯降低大鼠HPH的作用,其機制可能是通過抑制PKCα mRAN的表達作用于PKC信號通道而抑制低氧PA S