結(jié)締組織生長因子在低氧性肺動脈高壓中的作用.pdf

1、目的:觀察低氧性肺動脈高壓形成過程中大鼠肺組織中結(jié)締組織生長因子(CTGF)的表達變化，以及低氧對離體培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細胞分泌CTGF的影響，探討CTGF在低氧性肺動脈高壓中的作用。 方法:(1)將20只雄性SD大鼠隨機分為對照組和低氧組。以常壓低氧復(fù)制肺動脈高壓模型，右心導(dǎo)管插入法檢測平均肺動脈壓(mPAP)；分別稱量大鼠右心室(RV)和左心室加室間隔(LV+S)的重量，計算出右心室肥厚指數(shù)RV/(Lv+S)；圖像分析法測量

2、肺小動脈管壁厚度和面積，計算出肺小動脈管壁厚度指標(biāo)即管壁厚度占血管外徑的百分比(WT％)和管壁面積占血管總面積的百分比(WA％)；原位雜交和免疫組化法觀察肺小動脈CTGF mRNA及蛋白的表達，熒光PCR法觀察大鼠肺組織CTGF mRNA的表達。(2)低氧處理離體培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細胞，采用熒光：PCR法檢測細胞中CTGFmRNA的表達，酶聯(lián)免疫法檢測細胞上清液中CTGF濃度。 結(jié)果:(1)與對照組比較，低氧組大鼠平均肺動脈壓(

3、mPAP)明顯升高(P<0.01)、肺小動脈WT％、WA％以及RV/(LV+S)明顯增加(P<0.01)。低氧組大鼠肺組織CTGF mRNA水平、肺小動脈CTGF mRNA及蛋白水平與對照組比較，CTGF mRNA表達則明顯上調(diào)，肺小動脈CTGF蛋白水平明顯增加(P<0.01)。相關(guān)分析顯示低氧后大鼠肺小動脈CTGFmRNA及蛋白水平、肺組織CTGF mRNA水平與肺小動脈WT％和WA％均呈明顯正相關(guān)(P<0.01)。(2)與對照組相比

4、，人臍靜脈內(nèi)皮細胞在低氧培養(yǎng)6h后，其CTGF mRNA和蛋白表達無明顯變化(P>0.05)，低氧12h后上述指標(biāo)明顯增加(P<0.05)，24h后其增加則更加明顯(P<0.01)。同樣，細胞上清液中CTGF在缺氧6h即有明顯增加(P<0.05)，12h達到高峰(P<0.01)，24h稍有所下降，但仍高于常氧培養(yǎng)的細胞上清液中濃度(P<0.01)。 結(jié)論:(1)慢性低氧可以刺激CTGF的合成和釋放，CTGF可能參與了低氧性肺血管