抑郁癥大鼠腹腔巨噬細(xì)胞B7-1和B7-2表達(dá)的變化.pdf

1、目的：抑郁癥是以持久性的心境低落為主要臨床表現(xiàn)的一種復(fù)雜的心境障礙性疾病，是常見的應(yīng)激誘發(fā)的疾病。在應(yīng)激時機(jī)體的交感神經(jīng)系統(tǒng)被激活，交感神經(jīng)末梢和腎上腺髓質(zhì)釋放神經(jīng)介質(zhì)，導(dǎo)致血中的兒茶酚胺（主要包括腎上腺素和去甲腎上腺素）明顯升高。交感神經(jīng)對免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)除了通過改變淋巴器官的血流狀況和其內(nèi)部微環(huán)境而發(fā)揮作用外，還可以直接作用于淋巴細(xì)胞，通過免疫細(xì)胞表面的腎上腺素能受體調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞的功能。腎上腺素能受體有α和β兩種。巨噬細(xì)胞表面存在α2

2、、β2-AR兩種表型的受體，激活α2-AR則使巨噬細(xì)胞活性增強(qiáng)，而激活巨噬細(xì)胞表面的β2-AR則抑制巨噬細(xì)胞的活性。已有研究發(fā)現(xiàn)抑郁癥患者存在單核巨噬細(xì)胞的激活。活化的巨噬細(xì)胞可以作為抗原提呈細(xì)胞啟動適應(yīng)性免疫應(yīng)答，進(jìn)而誘導(dǎo)T細(xì)胞活化、增殖、分化為效應(yīng)細(xì)胞。巨噬細(xì)胞表面的協(xié)同刺激分子B7-1和B7-2都具有刺激T細(xì)胞增生的功能，但誘導(dǎo)T細(xì)胞分化的方向卻不同。B7-1優(yōu)先作為Th1細(xì)胞的協(xié)同刺激分子，促進(jìn)Th1細(xì)胞極化。而B7-2則優(yōu)先作

3、為Th2細(xì)胞極化的協(xié)同刺激分子，促進(jìn)Th2細(xì)胞極化?？梢娋奘杉?xì)胞表面的B7-1和B7-2表達(dá)對維持Th1和Th2細(xì)胞的平衡起著重要作用。已有研究發(fā)現(xiàn)抑郁癥患者體內(nèi)存在著TH1/Th2的失衡。
　　 然而，在抑郁癥中，交感腎上腺髓質(zhì)系統(tǒng)釋放的兒茶酚胺類物質(zhì)是否可以通過巨噬細(xì)胞表面的腎上腺素能受體影響B(tài)7-1和B7-2的表達(dá)，從而參與抑郁癥中TH1/Th2失衡的研究還未見相關(guān)報道。因此，本研究擬觀察抑郁癥大鼠腹腔巨噬細(xì)胞B7-1和B

4、7-2表達(dá)的變化，觀察腎上腺素以及腎上腺素能受體阻斷劑對大鼠腹腔巨噬細(xì)胞B7-1和B7-2表達(dá)變化的影響。為揭示抑郁癥的發(fā)生機(jī)制提供新的思路，為揭示社會心理因素致軀體疾病的中介機(jī)制提供線索，并可以為賠償醫(yī)學(xué)中精神損害賠償提供科學(xué)證據(jù)。
　　 方法1：將25只健康Wistar大鼠隨機(jī)分為正常對照組、抑郁模型組、普萘洛爾組、酚妥拉明組和丙咪嗪組，每組5只。采用8周慢性輕度不可預(yù)見性應(yīng)激建立抑郁癥大鼠模型，分別應(yīng)用非選擇性β-AR阻斷

5、劑普萘洛爾、非選擇性α-AR阻斷劑酚妥拉明和抑郁癥的治療藥丙咪嗪對大鼠進(jìn)行抗應(yīng)激預(yù)處理。實驗第1天和第56天時分別觀察各組大鼠的曠場行為和體重的變化，用流式細(xì)胞術(shù)測定腹腔巨噬細(xì)胞B7-1和B7-2表達(dá)的變化情況。
　　 方法2：采用體外培養(yǎng)Wistar大鼠腹腔巨噬細(xì)胞的方法，分別應(yīng)用10、100μmol/L腎上腺素刺激大鼠腹腔巨噬細(xì)胞24h后，再分別給予0.1、1、10μmol/L不同濃度的普萘洛爾、酚妥拉明和丙咪嗪培養(yǎng)24h，

6、收集細(xì)胞，應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)測定腹腔巨噬細(xì)胞B7-1和B7-2表達(dá)的變化情況。
　　 結(jié)果：用SPSS11.5統(tǒng)計分析軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（Mean±SD）表示。各組均數(shù)的比較行單因素方差分析（ANOVA），用最小顯著差法（least significant difference，LSD）作兩兩比較，以P<0.05為有顯著性差異。
　　 （1）曠場實驗結(jié)果
　　 ①實驗第1天，與正常對照組相比，各組

7、無明顯差別，不具有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 ②實驗第56天，與正常對照組水平運(yùn)動得分（83.00±21.39）和垂直運(yùn)動得分（17.60±2.30）相比，抑郁癥組大鼠水平運(yùn)動（31.80±19.00）得分和垂直運(yùn)動得分（3.20±2.28）均明顯下降；普萘洛爾組水平運(yùn)動得分（47.20±9.09）和垂直運(yùn)動得分（3.40±2.07）也明顯下降；而酚妥拉明組（72.80±15.55，16.80±7.19）與丙咪嗪組（83.20±10.1

8、6，15.80±4.26）無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 ③實驗第56天，與抑郁癥組相比，酚妥拉明組各指標(biāo)和丙咪嗪組各指標(biāo)均明顯提高。
　　 （2）體重結(jié)果
　　 ①實驗第1天，與正常對照組相比，各組大鼠的體重?zé)o明顯差別。
　　 ②實驗第56天，與正常對照組體重（286.86±41.96g）相比，抑郁癥組大鼠體重（241.60±33.93g）和普萘洛爾組大鼠體重（242.36±27.47g）明顯下降。酚妥拉明組（2

9、67.04±30.86g）和丙咪嗪組大鼠體重（245.72±27.16g）均無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 （3）抑郁癥大鼠腹腔巨噬細(xì)胞B7-1表達(dá)的變化
　　 ①與正常對照組相比，抑郁癥組和普萘洛爾組大鼠腹腔巨噬細(xì)胞的B7-1的表達(dá)下降。
　　 ②與抑郁癥組相比，酚妥拉明組和丙咪嗪組大鼠腹腔巨噬細(xì)胞的B7-1的表達(dá)升高。
　　 （4）抑郁癥大鼠腹腔巨噬細(xì)胞B7-2表達(dá)的變化
　　 ①與正常對照組相比，抑郁

10、癥組和普萘洛爾組大鼠腹腔巨噬細(xì)胞B7-2表達(dá)明顯增加。
　　 ②與抑郁癥組相比，普萘洛爾組大鼠腹腔巨噬細(xì)胞B7-2表達(dá)明顯升高，而酚妥拉明組和丙咪嗪組表達(dá)明顯下降。
　　 （5）腎上腺素及腎上腺素能受體阻斷劑對大鼠腹腔巨噬細(xì)胞B7-1和B7-2表達(dá)變化的影響
　　 ①與正常對照組相比，腎上腺素組、普萘洛爾組、酚妥拉明組和丙咪嗪組大鼠腹腔巨噬細(xì)胞B7-1表達(dá)均無明顯影響。
　　 ②與正常對照組相比，10μm

11、ol/L腎上腺素組、10μmol/L普萘洛爾組大鼠腹腔巨噬細(xì)胞B7-2表達(dá)均明顯升高。與10μmol/L腎上腺素相比，0.1、1μmol/L普萘洛爾組大鼠腹腔巨噬細(xì)胞B7-2表達(dá)均明顯下降，而10μmol/L普萘洛爾組大鼠腹腔巨噬細(xì)胞B7-2表達(dá)明顯升高。
　　 ③與正常對照組相比，10μmol/L腎上腺素組大鼠巨噬細(xì)胞B7-2表達(dá)有明顯升高。與10μmol/L腎上腺素組相比，0.1、1、10μmol/L酚妥拉明組大鼠腹腔巨噬細(xì)

12、胞B7-2表達(dá)均明顯下降。
　　 ④與正常對照組相比，10μmol/L腎上腺素組大鼠腹腔巨噬細(xì)胞B7-2表達(dá)明顯升高。與10μmol/L腎上腺素組相比，0.1、1、10μmol/L丙咪嗪組大鼠腹腔巨噬細(xì)胞B7-2表達(dá)均明顯下降。
　　 ⑤與正常對照組相比，100μmol/L腎上腺素組大鼠腹腔巨噬細(xì)胞B7-2表達(dá)明顯升高。與100μmol/L腎上腺素組相比，0.1、1、10μmol/L普萘洛爾組大鼠腹腔巨噬細(xì)胞B7-2表達(dá)

13、均明顯升高。
　　 ⑥與正常對照組相比，100μmol/L腎上腺素組、0.1μmol/L酚妥拉明組大鼠巨噬細(xì)胞B7-2的表達(dá)明顯升高。與100μmol/L腎上腺素組相比，0.1μmol/L酚妥拉明組大鼠腹腔巨噬細(xì)胞B7-2表達(dá)明顯升高，而1、10μmol/L酚妥拉明組大鼠腹腔巨噬細(xì)胞B7-2表達(dá)均明顯下降。
　　 ⑦與正常對照組相比，100μmol/L腎上腺素組大鼠腹腔巨噬細(xì)胞B7-2表達(dá)明顯升高。與100μmol/L腎