腺病毒介導NK4基因和B7-1基因共表達治療胰腺癌的體外研究.pdf

1、廣州醫(yī)學院碩士學位論文腺病毒介導NK4基因和B7-1基因共表達治療胰腺癌的體外研究姓名：吳坤松申請學位級別：碩士專業(yè)：外科學指導教師：彭和平20090520廣州醫(yī)學院碩士學位論文 腺病毒介導N K 4 基岡和B 7 ．1 基岡共表達治療胰腺癌的體外研究癌細胞中N K 4 基因和B 7 ．1 基因的m R N A 水平，W e s t e r nB l o t 檢狽J J B 7 ．1 蛋白的表達；4 ．M T T 觀察A d ．N K

2、4 一B 7 ．1 感染在體外對S W i 9 9 0 生長的影響，并檢測N K 4 ．B 7 ．1 重組腺病毒體的細胞克隆表達產(chǎn)物對血管內(nèi)皮細胞生長的影響。結果該病毒能有效感染H E K 2 9 3 細胞并在細胞內(nèi)成功增殖，通過不同M O I 的A d ．G F P腺病毒感染，發(fā)現(xiàn)在M O I d x 于8 0e f u ／m l 時，感染效率隨病毒滴度的增加而提高。當M O I 為6 0 e f u ／m l 時，S W l 9 9

3、 0 細胞的感染效率接近1 0 0 ％。以病毒感染2 4 d x 時N K 4 ．B 7 ．1基因表達水平為1 0 0 ％，B 7 ．1 及N K 4 都在第5 天達到最高水平的表達，隨后開始下降，第九天的表達水平只有2 4 d x 時表達量的1 ．5 倍左右。到1 2 天時兩個基因的表達水平都只剩+ [ “ 2 4 d x 時表達量的約1 ／4 。W e s t e r n ．b l o t 法檢測到A d - N K 4 ．B 7

4、．1 感染能明顯增強B 7 ．1 的表達；A d - N K 4 ．B 7 ．1 感染對S W l 9 9 0 的生長無明顯改變．病毒感染上清液可顯著抑H G F 誘導的血管內(nèi)皮細胞的牛長。結論1 ．腺病毒介導能有效地感染S W l 9 9 0 細胞并表達高水平的N K 4 和B 7 ．1 基因；2 ．腺病毒感染及A d - N K 4 ．B 7 ．1 的表達在體外對S W l 9 9 0 生長無明顯影響；3 ．A d - N K 4