人早胚間充質(zhì)干細(xì)胞向上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)型的研究（上皮干細(xì)胞發(fā)育的研究）.pdf

1、第二軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文人早胚間充質(zhì)干細(xì)胞向上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)型的研究（上皮干細(xì)胞發(fā)育的研究）姓名：仵敏娟申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：人體解剖與組織胚胎學(xué)指導(dǎo)教師：劉厚奇20050401人早胚間充質(zhì)干細(xì)胞向上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)型的研究(上皮干細(xì)胞發(fā)育的研究)目的：體外分離人早胚間充質(zhì)干細(xì)胞(hMSC)并誘導(dǎo)其分化為上皮細(xì)胞；探索間充質(zhì)干細(xì)胞向上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)型(mesenchymalepithelialtransition，MET)的途徑、方法和分子機(jī)制。方法：1

2、首先分離培養(yǎng)hMSC，進(jìn)行生物學(xué)特性和相關(guān)的安全性檢測(cè)，隨后進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)擴(kuò)增。2創(chuàng)建體外誘導(dǎo)培養(yǎng)體系，誘導(dǎo)hMSC分化為上皮細(xì)胞，體外實(shí)驗(yàn)MET；采用功能基因轉(zhuǎn)染的方式誘導(dǎo)hMSC分化為上皮細(xì)胞。3臨床實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證hMSC轉(zhuǎn)型而來(lái)的上皮細(xì)胞的治療效果。結(jié)果：1成功分離了hMSC：大規(guī)模培養(yǎng)擴(kuò)增后，仍能保持其生物學(xué)特性；低表達(dá)免疫移植排斥相關(guān)抗原。無(wú)細(xì)菌、真菌及HIV、HBV污染。2經(jīng)體外誘導(dǎo)培養(yǎng)體系誘導(dǎo)，可以分化為上皮細(xì)胞，并表達(dá)上皮細(xì)胞

3、特異性抗原(vWF、K19、K等)：功能基因轉(zhuǎn)染后，細(xì)胞形態(tài)改變明顯，E—cadherin及PFAK的表達(dá)量明顯增加。3，臨床實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證表明可有效治療大面積皮膚燒傷。結(jié)論：hMSC可在體外大規(guī)模培養(yǎng)，體外誘導(dǎo)培養(yǎng)體系誘導(dǎo)下可實(shí)現(xiàn)hMSC向上皮細(xì)胞的轉(zhuǎn)型。Objection：Tofindawaytoinducehumanearlyembryomesenchymalstemcells(hMSC)intoepithelialcells加vitr

4、othentoexplorethepossibleapproach，methodandmolecularmechanismduringMETMethods：1IsolatedandculturedhMSCinvitro，detectedcellsbiologicalcharacterpathogendetectioninculturemediumwasalsoundertaken2Createdainductionsystemforme

5、senchymal—epithelialtransition／nvitro3FoundthetransittedcellspromisinginskinbumtherapythroughclinicalapplicationResults：1hMSCwereisolatedandexpandedmvitrosuccessfullycultureexpandedhMSCremaineditsbiologyeharacterislicsan

6、dcytogeneficsstabilitywiththeculturesystempathogenfree，reachingtherequirementofnationalregulations2。hMSCcouldachieveransitionintoepithelialcellsinvitro，andexpressthespecialantigenofepithelialcells，suchasK19，vWE3Thetransi