人臍帶間充質干細胞對感染狀態(tài)下人肺泡Ⅱ型上皮細胞功能的影響研究.pdf

1、目的：
　　1.探討感染（銅綠假單胞菌Pseudomonas aeruginosa，PA）對人肺泡Ⅱ型上皮細胞(A549)凋亡的影響及人臍帶間充質干細胞（ Human Umbilical Cord Mesenchymal Stem Cells，hUCMSCs）對此感染狀態(tài)下A549細胞的保護作用。
　　方法：
　　1.建立人肺泡Ⅱ型上皮細胞(A549)體外感染模型，分為2組：(1)PA組：PA+A549；(2)對照組：

2、A549+PBS；分別觀察A549細胞的形態(tài)學改變、細胞存活率及細胞凋亡率。細胞凋亡的形態(tài)學改變通過透射電鏡觀察；細胞存活率通過CCK-8新型細胞增殖檢測試劑盒檢測；細胞凋亡率通過Annexin V-FITC/PI雙染色流式細胞檢測；
　　2.在人肺泡Ⅱ型上皮細胞(A549)體外感染模型的基礎上，觀察hUCMSCs對A549細胞的保護作用，分為2組：(1)PA組：PA+A549+PBS；(2)hUCMSCs組：PA+A549+hU

3、CMSCs；分別觀察A549細胞的形態(tài)學改變、細胞存活率、細胞凋亡率及SP-A的表達。A549細胞的形態(tài)學改變、細胞存活率及細胞凋亡率的檢測方法同前，SP-A的表達量通過Western Blot檢測。
　　結果：
　　1.細胞形態(tài)學觀察顯示，PA組細胞受損明顯，胞質出現(xiàn)空泡變性，染色質高度凝集，可見凋亡小體；對照組A549細胞結構完整，細胞膜表面微絨毛豐富，核膜完整，核周間隙結構正常，染色質均一。細胞存活率結果顯示：PA組與

4、對照組相比，PA組細胞存活率明顯減少[(97.37±2.07)％與(70.35±2.89)%]，兩組比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。細胞凋亡率結果顯示：PA組與對照組比較，PA組A549細胞凋亡率明顯增加[(2.55±0.11)%與(8.63%±0.16)%]，兩組比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　2.細胞形態(tài)學觀察顯示，hUCMSCs組細胞包膜結構完整，核膜完整，核仁明顯，核染色質電子密度低，染色質均一，未見凋亡

5、小體；PA組細胞受損明顯，胞質出現(xiàn)空泡變性，染色質高度凝集，可見凋亡小體。細胞存活率結果顯示：hUCMSCs組與 PA組相比， hUCMSCs組細胞存活率有所增加[(85.69±3.07)%與(70.35±2.89)%]，兩組比較差異有統(tǒng)計學意義（ P＜0.05）。細胞凋亡率結果顯示：hUCMSCs組與 PA組比較， PA組細胞凋亡率有所下降[(6.34±0.12)%與(8.63±0.16)%]，兩組比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）