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1、目的:采用高滲鹽-胰蛋白酶法制備脫細(xì)胞真皮基質(zhì)并進(jìn)行組織學(xué)觀察和微生物學(xué)檢測(cè),探討這種方法的可行性和機(jī)理.材料與方法:SD大鼠4只:麻醉后常規(guī)消毒鋪巾,以8%硫化鋇溶液脫去軀干部皮毛,切取大鼠軀干全層皮膚制成厚約0.4mm的中厚皮,1MNaCl溶液37℃浸泡48h分離表真皮,以0.25%胰蛋白酶+0.1%EDTA溶液37℃分別熱消化50、60、70、80、90分鐘脫去細(xì)胞成分,并進(jìn)行冷凍干燥處理.脫細(xì)胞真皮基質(zhì)作光鏡、電鏡觀察和微生物學(xué)
2、檢測(cè)并對(duì)不同時(shí)間熱消化處理的脫細(xì)胞真皮基質(zhì)進(jìn)行比較分析.結(jié)果:消化時(shí)間不同的脫細(xì)胞真皮基質(zhì)均具有柔軟、一定的柔韌性和伸展性、彈性好、彎曲不斷裂的特點(diǎn),組織學(xué)觀察見表皮細(xì)胞均完全去除,但是消化90分鐘,ADM的基底膜(Basement membrane complex,BMC)和膠原纖維的結(jié)構(gòu)與排列有不同程度的破壞;消化50、60、70分鐘的ADM雖然基底膜和膠原纖維的結(jié)構(gòu)與排列正常存在,但脫細(xì)胞不完全;消化80分鐘制備的ADM組織學(xué)檢查
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