KIAA0157和Hepassocin調節(jié)肝源性細胞增殖的機制研究.pdf

1、細胞的增殖調控是生命體賴以生存和發(fā)展的基礎，對細胞的增殖調控機制進行研究能夠為腫瘤的治療提供新的藥物靶點，并能為藥物的研發(fā)奠定理論基礎。本論文就兩個對細胞增殖起調控作用的蛋白KIAA0157和Hepassocin調節(jié)細胞增殖的機制進行研究。
　　 KIAA0157是一種功能不明的新基因。我們前期的研究發(fā)現KIAA0157在多種腫瘤組織中下調表達，過表達可抑制多種細胞的克隆形成能力。本論文研究發(fā)現：過表達KIAA0157能增強p5

2、3的穩(wěn)定性和p53活性，RNAi下調細胞內KIAA0157表達加速p53降解，抑制p53活性；KIAA0157以p53依賴的方式抑制細胞集落形成并誘導細胞發(fā)生G0期阻滯。KIAA0157可與MDM2發(fā)生相互作用，并抑制MDM2介導的p53泛素化和降解。這些研究結果表明KIAA0157可能通過MDM2調節(jié)p53穩(wěn)定性及其活性，并在腫瘤細胞增殖調控方面發(fā)揮作用，為今后的癌癥治療提供了新的靶點。
　　 Hepassocin(HPS)，

3、是一種肝臟特異表達蛋白質，在肝損傷修復、肝源細胞增殖調控中發(fā)揮重要作用。前期研究表明HPS可特異性刺激正常肝細胞增殖，但過表達抑制肝腫瘤細胞增殖，其分子機制不明。我們的研究發(fā)現：1)采用免疫印跡和ELISA方法證明正常肝細胞系L02細胞能夠產生并分泌HPS；2)HPS蛋白質的細胞外分泌依賴于N端22個氨基酸。3)利用FITC標記的HPS證實L02細胞膜上存在HPS特異受體；4)HPS中和抗體可中和L02細胞條件培養(yǎng)液的增殖刺激活性并抑制

4、L02細胞增殖。這些研究表明HPS可通過自分泌循環(huán)調節(jié)L02細胞增殖，阻斷這個循環(huán)可抑制L02細胞的增殖。為研究HPS對肝癌細胞生長的影響，我們在HepG2肝癌細胞中過表達野生型HPS和N端22個氨基酸缺失HPS(非分泌型HPS)，結果發(fā)現兩種HPS均可抑制HepG2細胞的克隆形成能力，并導致細胞發(fā)生G0/G1期阻滯，但非分泌型HPS的抑制作用要顯著強于野生型HPS。此外，雖然HepG2肝癌細胞也產生和分泌HPS，但外源HPS對肝癌細胞