螺內(nèi)酯對(duì)肝星狀細(xì)胞增殖和膠原合成的影響及其作用機(jī)制的研究.pdf

1、本研究從HSCs及肝纖維化形成過程中兩個(gè)主要因素ECM代謝和細(xì)胞因子入手,研究螺內(nèi)酯對(duì)HSCs增殖及膠原合成的作用,對(duì)HSCs MMPs、TIMPs及PDGF的影響.探討螺內(nèi)酯抗肝纖維化作用及其可能機(jī)制.第一部分醛固酮與螺內(nèi)酯對(duì)肝星狀細(xì)胞增殖及膠原合成的影響;目的實(shí)驗(yàn)擬研究ALD與螺內(nèi)酯對(duì)HSCs增殖及膠原合成的影響,探討螺內(nèi)酯在預(yù)防肝纖維化中的意義,為螺內(nèi)酯在抗肝纖維化應(yīng)用中提供依據(jù).結(jié)論 ALD對(duì)HSCs的增殖、膠原合成有一定的促進(jìn)

2、作用.在一定范圍內(nèi),呈明顯的劑量依賴性.螺內(nèi)酯可抑制HSCs的增殖、膠原合成.在一定濃度范圍內(nèi),劑量越高作用越明顯.螺內(nèi)酯作用后使HSCs阻滯在G<,0>/G<,1>期,從而抑制細(xì)胞分裂增殖.表明螺內(nèi)酯對(duì)HSCs增殖和膠原合成有明顯的抑制作用.第二部分螺內(nèi)酯對(duì)肝星狀細(xì)胞表達(dá)MMPs及TIMP-1的影響;目的 研究螺內(nèi)酯干預(yù)HSCs后金屬基質(zhì)蛋白酶MMP-2、MMP-9、MMP-13和其組織抑制因子TIMP-1變化.探討螺內(nèi)酯對(duì)膠原代謝影

3、響的機(jī)制.結(jié)論 螺內(nèi)酯可抑制HSCs TIMP-1基因和蛋白的表達(dá).增加間質(zhì)膠原酶MMP-13 mRNA及蛋白的含量.螺內(nèi)酯對(duì)HSCs MMP-2、MMP-9mRNA表達(dá)無影響.螺內(nèi)酯可能通過對(duì)MMPs及TIMP-1影響而促進(jìn)膠原降解.第三部分螺內(nèi)酯對(duì)肝星狀細(xì)胞表達(dá)PDGF-BB及PDGFR-β的影響;目的 本研究通過螺內(nèi)酯干預(yù)HSCs后對(duì)PDGF表達(dá)的影響,探討其抗肝纖維化的可能機(jī)制.結(jié)論 螺內(nèi)酯抑制HSCs PDGF-B mRNA和

4、PDGF-BB蛋白的表達(dá).螺內(nèi)酯對(duì)HSCs PDGFR-β mRNA表達(dá)無影響.螺內(nèi)酯可能抑制HSCs自分泌PDGF在拮抗肝纖維化形成中發(fā)揮作用.第四部分螺內(nèi)酯對(duì)PDGF-BB誘導(dǎo)HSCs增殖和膠原合成的影響及其作用機(jī)制的研究;目的 探討PDGF對(duì)大鼠HSCs金屬蛋白酶MMP-2、MMP-9、MMP-13、TIMP-1及其PDGF-BB、PDGFR-β的影響,探討螺內(nèi)酯對(duì)PDGF-BB誘導(dǎo)HSCs增殖和膠原合成的影響及其作用機(jī)制.結(jié)論

5、PDGF-BB可以促進(jìn)HSCs的增殖和表達(dá)膠原,螺內(nèi)酯對(duì)PDGF-BB刺激的HSCs的增殖和膠原合成有明顯的抑制作用,且呈明顯的劑量依賴性;PDGF-BB可以促進(jìn)HSCs表達(dá)TIMP-1,并上調(diào)MMP-13,對(duì)MMP-2、MMP-9基因表達(dá)無影響;體外實(shí)驗(yàn)PDGF干預(yù)48h時(shí)HSCs PDGF-B及PDGFR-β無變化;螺內(nèi)酯對(duì)PDGF-B表達(dá)有抑制作用.表明螺內(nèi)酯可呈劑量依賴性抑制PDGF刺激HSCs表達(dá)TIMP-1,而對(duì)PDGF誘導(dǎo)