基于癌基因SHP-2(PTPN11)酪氨酸磷酸酶高效、特異性抑制物4-肼基苯磺酸的合成與鑒定.pdf

1、【研究背景】
　　惡性腫瘤是嚴(yán)重危害人類健康的疾病,發(fā)病率連年居高不下,在死因中的構(gòu)成比也在逐年上升,卻仍然無法安全有效地治療。在所有治療手段中化學(xué)藥物治療一直占有重要地位,因此長期以來各研究機構(gòu)對抗腫瘤藥物的研究一直是高度重視,抗腫瘤藥物的市場前景也十分廣闊。傳統(tǒng)腫瘤藥物特異性差,不能精確地針對腫瘤細胞發(fā)揮作用,嚴(yán)重影響療效和患者生存質(zhì)量。由于腫瘤發(fā)生發(fā)展的本質(zhì)是腫瘤細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的紊亂,因此尋找腫瘤發(fā)生發(fā)展信號通路中各種靶分子

2、的抑制物應(yīng)是一個很好的途徑。近年來在抗腫瘤藥物的研究上取得了重大進展,越多越多的研究證明,磷酸酶在腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中扮演重要角色,是有效的抗腫瘤靶點,其中就包括SHP-2。SHP-2是酪氨酸磷酸酶家族中的一員,含有2個SH-2結(jié)構(gòu)域和激酶結(jié)構(gòu)域(PTP結(jié)構(gòu)域),廣泛存在于哺乳動物組織細胞中,在多種信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中都起著重要作用。有研究證明,大約50％的努南綜合征、髓系白血病、兒童型粒單細胞性白血病及多種實體瘤中存在SHP-2的突變,SH

3、P-2也因此而成為第一個被定義為癌基因的磷酸酶。腫瘤患者SHP-2激活突變位點主要位于N端SH2結(jié)構(gòu)域(最常見的是E76K或D61G/Y突變)或PTP結(jié)構(gòu)域,這些突變往往使SHP-2活性不同程度的增強,并促進腫瘤細胞惡性生物學(xué)行為的發(fā)生,與腫瘤惡性程度呈正相關(guān)。因此對其異常增高的磷酸酶活性有抑制作用的小分子抑制物應(yīng)該有良好的抗腫瘤效果。目前對SHP-2有高效特異性抑制作用的小分子抑制物還有很大的研發(fā)空間。我室前期研究初步篩選出三類結(jié)構(gòu)式

4、9個化合物可能與SHP-2分子結(jié)構(gòu)相結(jié)合,或可抑制其異常增高的磷酸酶活性。其中三類具有代表性的化合物分別命名為＃162、＃216、＃220化合物。關(guān)于這些化合物對SHP-2活性顯著增強的腫瘤細胞是否具有特異性的抑制作用尚無明確報導(dǎo)。本文試圖通過合成此類目標(biāo)化合物,并檢測相關(guān)化合物對SHP-2激活突變的腫瘤細胞的生物學(xué)行為的影響來鑒定該化合物是否具有特異、高效的抗腫瘤作用,為新的抗腫瘤藥物的研發(fā)提供一些參考。
　　【研究方法】

5、>　　為了鑒定目標(biāo)化合物對SHP-2激活突變的腫瘤細胞惡性生物學(xué)行為的影響,首先合成純化了目標(biāo)化合物＃162,并合成了＃216化合物的合成方法中所必須的部分中間產(chǎn)物,然后使用＃162來處理SHP-2磷酸酶活性異常增高的腫瘤細胞來鑒定它對SHP-2酪氨酸磷酸酶的高效特異性抑制作用并討論其可能的機制。實驗結(jié)果如下。
　　【研究結(jié)果】
　　(1)成功合成了＃162號化合物4-肼基苯磺酸,應(yīng)用熔點測定、薄層色譜、核磁共振氫譜等檢測確

6、認了其結(jié)構(gòu),提示純化完成。
　　(2)合成了＃216化合物的合成步驟中所必須的部分中間產(chǎn)物。
　　(3)鑒定了＃162號化合物對SHP-2激活突變的腫瘤細胞增殖力與遷移力的抑制作用,證明＃162號化合物可通過對活性異常增高的SHP-2酪氨酸磷酸酶特異、高效的抑制作用來靶向性地抑制此類腫瘤細胞的增殖與遷移。
　　【結(jié)論】
　　(1)成功合成了＃162號化合物4-肼基苯磺酸以及＃216號化合物合成方法中所必須的中間產(chǎn)