FASAY技術(shù)在肝癌p53基因突變檢測(cè)中的應(yīng)用及其對(duì)p53基因突變體顯性抑制效應(yīng)的研究.pdf

1、復(fù)旦大學(xué)碩士學(xué)位論文FASAY技術(shù)在肝癌p53基因突變檢測(cè)中的應(yīng)用及其對(duì)p53基因突變體顯性抑制效應(yīng)的研究姓名：吳小末申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：遺傳學(xué)指導(dǎo)教師：霍克克20060529復(fù)旦大學(xué)碩士論文中文摘要蛋白是熱動(dòng)力學(xué)穩(wěn)定性很低，位于主架結(jié)構(gòu)beta片層鏈上的突變往往會(huì)造成整個(gè)p53蛋白的不能正確折疊甚至不能折疊，很可能是這25個(gè)氨基酸的缺失突變?cè)斐闪说鞍椎牟荒苷_折疊，可能使它不能和野生型的蛋白形成四聚體，所以沒有產(chǎn)生顯性抑制效應(yīng)。進(jìn)

2、一步，我們分析了第一部分實(shí)驗(yàn)中得到的所有錯(cuò)義突變，發(fā)現(xiàn)所有位于大loopL3和LsHmotif上的突變都有顯性抑制效應(yīng)，而位于beta片層鏈和連接beta片層鏈間的小100p上的突變都不具有抑制效應(yīng)，這個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果和lnga等的報(bào)道一致。但是我們對(duì)造成隱性表型的原因有不同的看法，我們認(rèn)為是因?yàn)樵赽eta片層鏈上的突變可能使p53蛋白的彳i能正確折疊，從而不能參與四聚體的形成，才使野生型p53蛋白轉(zhuǎn)錄激活功能不受影響。而Inga的模型認(rèn)為除

3、失去形成四聚體結(jié)構(gòu)域的突變體外，其它所有類型的突變體都可以參與了四聚體的形成，當(dāng)缺陷型的P53蛋白轉(zhuǎn)錄激活功能被野生型蛋白能夠彌補(bǔ)時(shí)就為隱性突變(recessivemutant)，當(dāng)不能彌補(bǔ)時(shí)就為顯性突變(dominantmutant)。Inga的模型可以很好的解釋位于連接beta片層鏈間的小loop環(huán)上的突變。這些突變位點(diǎn)上的氨基酸既不直接參與形成主架結(jié)構(gòu)，也不是位于p53蛋白和DNA相互作用的表而，它們的突變可能對(duì)P53蛋白整個(gè)的結(jié)

4、構(gòu)和DNA相結(jié)合的影響很小，所以功能上的缺陷可以被野生型的p53蛋白彌補(bǔ)。雖然從細(xì)胞的水平上看這兩種類型的突變都是沒有顯性的抑制表型，但是前一種類型的隱性突變可能比后一種類型的隱性突變?cè)谀[瘤發(fā)生的過程中有更重要的作用，岡為它們的功能缺陷不能被野生型p53蛋白彌補(bǔ)，可能也更不易被P53蛋白的E3泛素連接酶MDM2，COPl，Pirh2等識(shí)別和降解而在腫瘤細(xì)胞內(nèi)聚集。關(guān)鍵詞：HccFAsAY249位密碼子突變熱點(diǎn)p53突變顯性抑制效應(yīng)P53