大鼠下頜骨牽張成骨蛋白質(zhì)組學初步分析.pdf

1、牽張成骨(DistractionOsteogenesis,DO),是指在已截開的骨段間或在骨縫處通過安置牽張裝置,施加牽引力,牽開骨斷端,在因此產(chǎn)生的骨間隙中形成新生骨組織,以達到骨延長及骨增寬的目的。目前,隨著牽張成骨技術(shù)的成熟和完善,此技術(shù)得到了越來越多的地應用,尤其是在糾正頜面部畸形及修復骨缺損的的治療方面得到了廣泛的肯定。隨著實驗研究的深入及發(fā)展,促進牽張成骨新骨形成的辦法愈來愈多,但牽張成骨新骨形成的機理上存在很多疑問,觀點上

2、也存在一定分歧。后基因組時代,功能基因組的研究已經(jīng)逐漸取代遺傳信息的揭示成為了研究的重點。蛋白質(zhì)是生物功能最為主要的體現(xiàn)者,而其自身有著特有的活動規(guī)律,例如蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)變化、轉(zhuǎn)運定位、修飾加工、蛋白質(zhì)與其他生物大分子的相互作用等,在基因水平的研究是無法獲得的。正因如此,對細胞及機體蛋白質(zhì)組成及其活動規(guī)律從整體水平進行探討,成為了人們迫切的愿望。蛋白質(zhì)組是整體概念,隨著時間空間變化而發(fā)生動態(tài)變化。只有開展蛋白質(zhì)組學研究,即對所有蛋白質(zhì)總和進

3、行研究,才能更好地揭示生命活動的本質(zhì)和發(fā)現(xiàn)生命活動的規(guī)律,才能更好地掌握生命現(xiàn)象和本質(zhì)的。本研究的主要目標是建立大鼠下頜骨牽張成骨的動物模型,對其牽張區(qū)域內(nèi)的新生組織進行總蛋白的提取,蛋白質(zhì)定量,運用iTRAQ技術(shù)進行蛋白質(zhì)組學分析,分析大鼠下頜骨牽張成骨過程中新生組織蛋白表達的改變,從整體水平探討其新生骨組織的蛋白質(zhì)變化,為闡明揭示下頜骨牽張成骨的機制提供理論依據(jù)。全文分為2部分:
　　1大鼠下頜骨牽張成骨新生骨組織蛋白質(zhì)定量實

4、驗研究
　　目的:建立大鼠下頜骨牽張成骨模型,對牽張區(qū)域新生組織進行總蛋白提取及蛋白質(zhì)定量。方法:以6只雄性SD大鼠為實驗動物,行單側(cè)下頜骨牽張成骨,隨機分為2組,每組3只,分別于固定期第1d(A組)及14d(B組)取材,對其牽張區(qū)域總蛋白提取及蛋白質(zhì)定量檢測,應用SPSS12.0軟件包進行配對t檢驗。結(jié)果:成功提取大鼠下頜骨牽張成骨牽張區(qū)域新生組織標本,測定A組3個蛋白質(zhì)樣本與B組3個蛋白質(zhì)樣本的蛋白質(zhì)濃度(R=0.984),測

5、量結(jié)果運用SPSS12.0軟件進行配對t檢驗,P<0.01。結(jié)論:大鼠下頜骨牽張成骨牽張區(qū)域新生組織固定期第1d較固定期14d,總蛋白表達含量明顯升高,提示在牽張成骨早期,蛋白質(zhì)表達活躍,為下一步蛋白質(zhì)組學分析奠定了基礎(chǔ)。
　　2大鼠下頜骨牽張成骨新生骨組織蛋白質(zhì)組學初步分析
　　目的:探討用蛋白質(zhì)組學iTRAQ技術(shù)分析大鼠下頜骨牽張成骨過程中新生組織蛋白表達的改變。方法:應用iTRAQ技術(shù)對實驗一下頜骨牽張成骨新生組織的蛋