CYP3AP1和ABCC2基因多態(tài)性對阿托伐他汀調(diào)脂療效的影響.pdf

1、【目的與背景】阿托伐他汀(atorvastatin)是最有效的調(diào)脂藥物之一,一系列大規(guī)模的臨床試驗(yàn)肯定了其在冠心病整體防治中的重要作用,然而在臨床應(yīng)用中發(fā)現(xiàn)阿托伐他汀存在著不容忽視的個體差異(10％~70％)。目前認(rèn)為,基因多態(tài)性所致的藥物代謝酶和轉(zhuǎn)運(yùn)體活性的差異,可能是導(dǎo)致阿托伐他汀調(diào)脂療效產(chǎn)生差異的主要原因。阿托伐他汀在體內(nèi)的代謝與肝微粒體酶CYP3A有關(guān),其中80％以上由CYP3A4/5所代謝,在肝臟發(fā)揮藥理作用后阿托伐他汀及其代

2、謝物經(jīng)ABCC2基因編碼的MRP2以及其它轉(zhuǎn)運(yùn)體轉(zhuǎn)運(yùn)出肝細(xì)胞。近年來的研究證實(shí)CYP3AP1-44G>A不僅與CYP3A4和CYP3A5相關(guān)單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)處于連鎖不平衡,而且該位點(diǎn)的變異能夠降低CYP3A的活性。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)CYP3A4~*1G、CYP3A5~*3多態(tài)性能夠影響阿托伐他汀或辛伐他汀降脂療效。但尚未見CYP3AP1-44G>A多態(tài)性與阿托伐他汀降脂療效相關(guān)性的報道。在中國漢族人群,ABCC2-24C>T和ABC

3、C21249G>A是變異頻率較高的兩個位點(diǎn),且國外文獻(xiàn)報道其變異與MRP2的表達(dá)或功能相關(guān)。然而國內(nèi)、外文獻(xiàn)中均未見ABCC2-24C>T和ABCC21249G>A多態(tài)性與阿托伐他汀調(diào)脂療效的相關(guān)性報道。因此,本研究旨在探討高脂血癥病人中CYP3AP1-44G>A,ABCC2-24C>T和ABCC21249G>A多態(tài)性及其單體型對阿托伐他汀調(diào)脂療效的影響,從而篩選出與阿托伐他汀治療相關(guān)的遺傳標(biāo)志物,為實(shí)現(xiàn)以基因?yàn)閷?dǎo)向的藥物治療和個體化給

4、藥提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　【材料與方法】1.研究對象202例河南漢族高脂血癥患者[總膽固醇(TC)>6 mmol/l或低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)>3.36 mmol/l]均為鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院的住院或門診病人。受試者在用藥前接受體格檢查和既往病史調(diào)查。本研究方案得到鄭州大學(xué)醫(yī)學(xué)倫理委員會認(rèn)可,所有受試者了解試驗(yàn)過程并均簽署知情同意書。2.基因型檢測抽取高脂血癥患者外周靜脈血2~3 ml,用酚-氯仿法提取基因組DNA;采用聚合酶

5、鏈反應(yīng)-限制性片段長度多態(tài)性分析(PCR-RFLP)技術(shù),對CYP3AP1-44G>A,ABCC2-24C>T和ABCC21249G>A多態(tài)性位點(diǎn)進(jìn)行檢測分析。通過PCR擴(kuò)增產(chǎn)物直接測序驗(yàn)證基因型檢測方法的可靠性。3.阿托伐他汀降脂療效的評價所有入選者每晚頓服阿托伐他汀片20 mg,連續(xù)用藥4周。測定患者給藥前及給藥4周后血清TC、LDL-C、HDL-C和TG濃度。用給藥4周后TC、LDL-C、HDL-C和TG的改變比例作為評價阿托伐他

6、汀調(diào)脂療效的標(biāo)準(zhǔn)。根據(jù)基因分型結(jié)果將患者分組,觀察CYP3AP1-44G>A,ABCC2-24C>T和ABCC21249G>A多態(tài)性與阿托伐他汀調(diào)脂療效的關(guān)系。4.統(tǒng)計學(xué)分析根據(jù)基因分型結(jié)果將高脂血癥患者分組,各組計量資料采用mean±SD表示。使用SPSS13.0軟件以χ~2檢驗(yàn)檢測等位基因和基因型分布是否符合Hardy-Weinberg平衡;用χ~2檢驗(yàn)或Fisher’s精確概率檢驗(yàn)法檢測不同種族間基因多態(tài)性分布的差異;對數(shù)據(jù)進(jìn)行單

7、因素方差分析(ANOVA),并采用協(xié)方差分析,以年齡、體重指數(shù)和給藥前血脂水平為協(xié)變量評價各基因組間阿托伐他汀調(diào)脂療效的差異,各組間比較采用LSD法。以α=0.05作為檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。
　　【結(jié)果】1.高脂血癥病人中CYP3AP1-44G>A,ABCC2-24C>T和ABCC21249G>A等位基因的頻率CYP3AP1-44G>A,ABCC2-24C>T和ABCC21249G>A等位基因在河南高脂血癥人群中的頻率分別為75.4％、20.

8、5％和11.9％,等位基因和基因型分布符合Hardy-weinberg平衡(P>0.05)。CYP3AP1-44G>A等位基因的頻率與文獻(xiàn)報道的印度人群(67.8％),非裔美國人(64.6％)和南亞人群相似(63.5％)(P=0.125,P=0.100,P=0.060),而顯著低于高加索健康人群(92.1％)(P=0.000)。ABCC2-24C>T等位基因的頻率與文獻(xiàn)報道的亞洲人群(17.3％)和高加索人群相似(23.3％)(P=0.

9、331,P=0.475)。ABCC21249G>A等位基因的頻率與日本人群(9.3％)和高加索人群(16.8％)相似(P=0.272,P=0.106),而低于黑種人群(28.6％)(P=0.043)。2.CYP3AP1-44G>A多態(tài)性對阿托伐他汀調(diào)脂療效的影響阿托伐他汀治療4周后,GG、GA和AA基因型亞組之間TC、LDL-C、HDL-C和TG的改變比例均無顯著性差異(P>0.05)。男性患者G等位基因攜帶(GG+GA)者TC的濃度在

10、給藥4周后明顯低于AA型基因攜帶者(P=0.020),且兩組之間TC改變比例有顯著性差異(P=0.003),但兩組間LDL-C、HDL-C和TG的改變比例均無顯著性差異(P>0.05)。女性患者治療前和治療4周后各血脂指標(biāo)在G等位基因攜帶組和AA型攜帶者之間無顯著性差異(P>0.05),且兩組間TC、LDL-C、HDL-C和TG的改變比例亦無顯著性差異(P>0.05)。3.ABCC2-24C>T多態(tài)性對阿托伐他汀調(diào)脂療效的影響阿托伐他汀

11、治療前以及治療4周后,CC、CT和TT基因型亞組之間的TG濃度均有顯著性差異(P<0.05),但各基因型亞組之間TC、LDL-C、HDL-C和TG的改變比例均無顯著差異(P>0.05)。按性別分組時,男性T等位基因攜帶(TC+TT)組治療前的TG濃度高于CC組(P=0.022),但治療4周后無顯著性差異(P=0.080),且兩組之間TC、LDL-C、HDL-C和TG的改變比例均無顯著性差異(P>0.05)。女性患者兩組間TC、LDL-C

12、、HDL-C和TG的改變比例亦均無顯著性差異(P>0.05)。4.ABCC21249G>A多態(tài)性對阿托伐他汀調(diào)脂療效的影響阿托伐他汀治療前和治療4周后GG、GA和AA三個亞組間TC、LDL-C、HDL-C和TG的濃度均無顯著性差異(P>0.05)。給藥4周后各基因型亞組之間TC、LDL-C、HDL-C和TG的改變比例亦無顯著性差異(P>0.05)。按性別分組時,男性患者A等位基因攜帶(GA+AA)組在治療4周后的TG濃度顯著高于GG組患

13、者(P=0.023),但兩組之間TC、LDL-C、HDL-C和TG的改變比例均無顯著性差異(P>0.05)。女性患者兩組間TC、LDL-C、HDL-C和TG的改變比例亦均無顯著性差異(P>0.05)。5.ABCC2-24C>T和ABCC21249G>A構(gòu)成的單體型對阿托伐他汀調(diào)脂療效的影響ABCC2-24C>T和ABCC21249G>A兩個SNPs位點(diǎn)連鎖不平衡關(guān)系較弱(D’:0.1164,r~2:0.293,χ~2=0.1533,P=

14、0.695)。兩個SNPs位點(diǎn)構(gòu)成的各單體型之間TC、LDL-C、HDL-C和TG的改變比例均無顯著性差異(P>0.05)。
　　【結(jié)論】1.CYP3AP1-44G>A,ABCC2-24C>T和ABCC21249G>A等位基因在河南高脂血癥人群中的頻率分別為75.4％,20.5％和11.9％。2.CYP3AP1-44G>A多態(tài)性影響男性患者阿托伐他汀的降脂療效,G等位基因攜帶組TC改變比例顯著高于AA型攜帶者。CYP3AP1-44