ABCB1,ABCC2,CYP3A5和UGT2B7基因多態(tài)性對抗癲癇藥物療效的影響.pdf

1、背景:藥物作用后產(chǎn)生的差異有一些是由遺傳因素導(dǎo)致的。遺傳藥理學(xué)(Pharmacogenetics)就是研究遺傳因素對藥物反應(yīng)影響的學(xué)科，它不但研究遺傳變異引起的藥物反應(yīng)異常，而且研究引起藥物反應(yīng)個體和群體差異的變異基因。研究個體遺傳差異與藥物效應(yīng)之間相互關(guān)系的學(xué)科稱之為藥物基因組學(xué)(Pharmacogenomics)，它以基因多態(tài)性(Gene polymorphism)為其研究的分子機(jī)制，對整個基因組范圍內(nèi)所有編碼與體內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)、藥物代謝、

2、靶點(diǎn)等效應(yīng)有關(guān)蛋白質(zhì)的基因進(jìn)行研究。遺傳藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，受體、藥物代謝酶和轉(zhuǎn)運(yùn)體活性的改變是導(dǎo)致臨床上藥物治療中出現(xiàn)藥物反應(yīng)個體差異常見和重要原因之一，藥物代謝酶、轉(zhuǎn)運(yùn)體和受體基因的遺傳多態(tài)性是藥物作用個體差異的重要決定因素。
　　 抗癲癇藥物通過吸收，分布，代謝，排泄的過程，產(chǎn)生藥理作用，不同的個體有時產(chǎn)生不同程度的藥物作用，其中，基因多態(tài)性起著至關(guān)重要的作用。
　　 ATP結(jié)合盒(ATP-binding casset

3、te，ABC)轉(zhuǎn)運(yùn)體是大多數(shù)藥物和代謝產(chǎn)物的轉(zhuǎn)運(yùn)體。在人體生理，病理和藥理過程中發(fā)揮重要作用。因此這一轉(zhuǎn)運(yùn)體家族與藥物反應(yīng)和治療效果有者十分密切的關(guān)系。一些ABC轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白如ABCB1，ABCC2等，在內(nèi)皮細(xì)胞，星狀膠質(zhì)細(xì)胞，人腦組織神經(jīng)元中表達(dá)并介導(dǎo)抗癲癇藥物的轉(zhuǎn)運(yùn)，因此，這些轉(zhuǎn)運(yùn)體基因的多態(tài)性很有可能與抗癲癇藥物療效相關(guān)。
　　 抗癲癇藥物中，卡馬西平是一種經(jīng)典的廣泛運(yùn)用于癲癇治療的鈉通道阻滯劑，它主要P450酶中CYP3A

4、4/5，CYP2C8代謝為活性產(chǎn)物Carbamazepine10，11-epoxide(CBZ-E)，前者起主要作用，目前還發(fā)現(xiàn)，它的唯一一個Ⅱ相代謝酶UGT家族成員UGT2B7在代謝中也起著重要作用。因此，這些代謝酶的基因多態(tài)性對卡馬西平的穩(wěn)態(tài)血藥濃度可能有重要影響。
　　 因此我們研究中國癲癇患者中ABCB1，ABCC2基因多態(tài)性與抗癲癇藥物耐藥的相關(guān)性，以及中國癲癇患者卡馬西平穩(wěn)態(tài)血藥濃度與CYP3A5, UGT2B7基因

5、多態(tài)性的相關(guān)性。
　　 目的:一些研究發(fā)現(xiàn)ATP結(jié)合盒(ATP-binding cassette，ABC)轉(zhuǎn)運(yùn)體在癲癇病人抗癲癇藥物耐藥中起著至關(guān)重要的作用，尤其是ABCB1和 ABCC2?？R西平是常用抗癲癇藥物，其血藥濃度的監(jiān)測對癲癇藥物的療效和副作用有很大意義。本實(shí)驗(yàn)的目的是考察ABCB1和ABCC2基因多態(tài)性與中國癲癇病人抗癲癇藥物療效的相關(guān)性研究并且研究CYP3A5*3與UGT2B7基因多態(tài)性對卡馬西平穩(wěn)態(tài)血藥濃度的影

6、響。本論文旨在探索抗癲癇藥物用藥相關(guān)的遺傳藥理學(xué)影響因素，最終目的為抗癲癇藥物的臨床規(guī)范合理個體化應(yīng)用提供新思路，新方法。
　　 方法:收集537份中國癲癇患者外周血標(biāo)本(217例耐藥患者，320例藥物有效患者)，采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-限制性片段長度多態(tài)性(Polymerase Chain Reaction-Restriction Fragment Length Polymorphism,PCR-RFLP)的方法對ABCBl rs

7、1045642(3435C＞T) and ABCC2rs717620(-24C＞T), rs3740066(3972C＞T)，和rs2273697(1249G＞A)進(jìn)行基因型分析。從達(dá)到穩(wěn)態(tài)血藥濃度的癲癇患者中根據(jù)納入排除標(biāo)準(zhǔn)篩選出68位符合條件的患者進(jìn)行臨床實(shí)驗(yàn)。收集患者完整臨床資料，采集5ml外周血抽提DNA，直接測序法和PCR-RFLP法檢測CYP3A5*3和UGT2B7*2，*3基因型。采用unpaired t-test或者Wi

8、lcoxon rank sum test比較不同基因型患者相關(guān)資料。
　　 結(jié)果:
　　 1.中國癲癇病人中ABCC2基因rs717620-24TT基因型與抗癲癇藥物耐藥顯著相關(guān)。ABCC2基因rs717620-24 CT+TT基因型，rs3740066(3972C＞T) CT+TT基因型OR值顯著高于耐藥組。
　　 2.ABCC2基因rs2273697(1249G＞A)和ABCB1基因rs1045642(343

9、5C＞T)多態(tài)性在耐藥癲癇患者和藥物反應(yīng)患者中未有顯著性差異。
　　 3.癲癇病人耐藥組單倍型TGT頻率(AB CC2-24C＞T/ABCC21249G＞A/ABCC23972C＞T)顯著高于藥物反應(yīng)組。
　　 4.UGT2B7*2基因型對卡馬西平單藥治療癲癇患者穩(wěn)態(tài)血藥濃度有影響。UGT2B7*1/*2+*2/*2組劑量標(biāo)化后的穩(wěn)態(tài)血藥濃度比UGT2B7*1/*1基因型低，與UGT2B7野生型癲癇患者相比，突變型患者需