P物質對體外培養(yǎng)人牙髓細胞生物學特性的影響.pdf

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2、學位論文獨創(chuàng)性聲明本論文是在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特別加以標注和致謝等內容外，文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果，指導教師對此進行了審定。本論文由本人獨立撰寫，文責自負。研究生簽名：闡廁車 導師簽章：拋y 年3 月噦日一_摹。／，。，t 冀0 ≯夢0曠。鬃奠囂。一 。簿務～ ：．：j ：碳相、，，．J ．．。＼＼月 氧弓蓋年 導懌雨蘭<島南司，’步懶砂學 級 二中文摘要P 物質對體外培養(yǎng)人牙髓細胞

3、生物學特性的影響摘 要隨著社會的發(fā)展，由各種原因導致的牙齒意外露髓逐漸增多，傳統(tǒng)蓋髓方法效果往往不理想，近年來，越來越多的學者把牙髓生物學研究的重點放到了牙髓細胞上，從細胞水平為臨床研究提供實驗基礎。目的：采用組織塊酶解法培養(yǎng)具有干細胞特性的人牙髓細胞，通過觀察P 物質對體外培養(yǎng)人牙髓細胞的增殖、分化及超微結構的影響，探討P物質對體外培養(yǎng)人牙髓細胞生物學特性的影響及其作用機制，為臨床開展活髓保存治療提供一條新的思路。方法：1 人牙髓細胞

4、的原代培養(yǎng)及組織來源鑒定選取因阻生或正畸需要而拔除的健康、完整、無齲、無隱裂恒牙，清理牙齒表面后于無菌條件下取出牙髓組織，采用組織塊酶解法進行原代培養(yǎng)，首次傳代選擇原位傳代，以后待細胞長滿孔底8 0 ％后按常規(guī)傳代方法進行傳代。取第3 代對數(shù)生長期細胞用S A B C 法進行波形蛋白、角蛋白免疫組化染色，光鏡下觀察；用H E 對蓋玻片上的細胞進行染色，光鏡下觀察細胞形態(tài)。2 人牙髓細胞生長曲線的檢測取第3 代人牙髓細胞，制成單細胞懸液，

5、以2 x 1 0 4 個／孔的密度接種于2 4 孔板，自接種后第二天開始每天隨機消化5 孔進行細胞計數(shù)，取平均值。連續(xù)計數(shù)8 天，繪制細胞生長曲線。3P 物質對H D P C s 增殖活性的影響選取第4 代人牙髓細胞制備成細胞懸液，以2 x 1 0 4 個／1 m 的密度接種于9 6 孔培養(yǎng)板，每孑L 2 0 0 微升。2 4 4 , 時后，棄去原培養(yǎng)液，隨機分為5 個實驗組和1 個對照組，另設一空白對照組，實驗組分別加入用含1 ％F