他卡西醇對體外培養(yǎng)人黑素細(xì)胞生物學(xué)性狀的影響.pdf

1、一、研究背景與目的 白癜風(fēng)是皮膚科常見的一種獲得性色素脫失性皮膚病，發(fā)病率約為0.5～1％，其發(fā)病率無性別差異。確切的發(fā)病機(jī)制目前仍不清楚，可能與遺傳、神經(jīng)、精神、自身免疫等多種因素有關(guān)。目前的治療手段主要包括：外用補(bǔ)骨脂素類藥物、糖皮質(zhì)激素、免疫調(diào)節(jié)劑，自體表皮移植，局部光療或光化學(xué)療法：窄譜中波紫外線、準(zhǔn)分子激光及準(zhǔn)分子光，中醫(yī)中藥等，但目前白癜風(fēng)的治療尚無特效療法，個體對不同療法的療效差異很大，往往療程較長且易出現(xiàn)不良反應(yīng)

2、。 近年來臨床上嘗試使用他卡西醇[1，24(OH)2D3；商品名萌爾夫，上海百潤]局部外用治療白癜風(fēng)，取得了一定療效。他卡西醇是活性維生素D3衍生物，文獻(xiàn)報(bào)道活性維生素D3對角質(zhì)形成細(xì)胞具有增殖抑制、誘導(dǎo)分化的作用，最初應(yīng)用于治療銀屑病。1998年Glaser等報(bào)道兩例銀屑病患者在采用局部外用卡(鈣)泊三醇(維生素D3衍生物)聯(lián)合光療后出現(xiàn)色素沉著現(xiàn)象。隨后國內(nèi)外的臨床醫(yī)生嘗試將其單獨(dú)局部外用或聯(lián)合光療、激素等治療白癜風(fēng)，均取得

3、了很好的臨床療效。但也有研究報(bào)道鈣泊三醇聯(lián)合UVB不能提高白癜風(fēng)復(fù)色。由于該療法應(yīng)用于治療白癜風(fēng)的時間尚短，目前關(guān)于活性維生素D3衍生物治療引起白癜風(fēng)皮損區(qū)復(fù)色的機(jī)制研究較少。Ranson等報(bào)道1α-25，二羥維生素D3可以提高酪氨酸酶活性，Watabe等1α-25，二羥維生素D3誘導(dǎo)小鼠前黑素細(xì)胞的分化與刺激內(nèi)皮素B受體的表達(dá)，而國內(nèi)徐前喜等報(bào)道1α，25-二羥維生素D3和UVB能促進(jìn)黑素細(xì)胞增殖及黑素合成。關(guān)于他卡西醇治療白癜風(fēng)的作

4、用機(jī)制國內(nèi)外研究較少，國外Katayama等報(bào)道聯(lián)合應(yīng)用他卡西醇和日照可以引起體外培養(yǎng)黑素細(xì)胞的c-Kit mRNA表達(dá)上調(diào)，目前國內(nèi)尚未見實(shí)驗(yàn)室研究方面的報(bào)道。 我們推測，他卡西醇治療白癜風(fēng)有可能是通過直接或間接作用于黑素細(xì)胞促進(jìn)復(fù)色，但目前尚未有實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)，為了初步研究他卡西醇治療白癜風(fēng)的作用機(jī)制，我們觀察了他卡西醇對體外培養(yǎng)人黑素細(xì)胞生物學(xué)性狀的影響。 二、方法與結(jié)果 1.體外黑素細(xì)胞培養(yǎng)，給予不同濃度他

5、卡西醇處理，采用MTT法測定細(xì)胞增殖，堿裂解法測定黑素合成，多巴氧化法檢測酪氨酸酶活性。結(jié)果：10-8 mol/L他卡西醇能刺激黑素細(xì)胞增殖，10-8和10-9mol/L能促進(jìn)黑素合成，10-9～10-6 mol/L的他卡西醇能顯著增強(qiáng)正常人黑素細(xì)胞酪氨酸酶活性。 2.運(yùn)用半定量RT-PCR法檢測TYR、TRP-1 mRNA的表達(dá)。結(jié)果：10-9～10-6mol/L的他卡西醇能顯著上調(diào)TYR、TRP-1 mRNA的表達(dá)。