HPV58型病毒E1^E4蛋白B細(xì)胞線性表位研究.pdf

1、宮頸癌是世界上第三常見(jiàn)的影響女性健康的癌癥，而高危型HPV是感染是宮頸癌的病因，其中以HPV16型檢出率最高，危害性也最大。HPV58型作為15種高危型HPV的一種，雖然在世界范圍內(nèi)的感染率比HPV16和HPV18低，卻存在較大的地區(qū)分布的差異，特別是在我國(guó)東部和南部部分地區(qū)及其他亞洲東部地區(qū)有著很高的感染率和致死率。
　　E1^E4是HPV一個(gè)早期非結(jié)構(gòu)蛋白，它的表達(dá)關(guān)系到病毒的復(fù)制和侵襲，但其具體功能還未被人們完全了解，HPV

2、58型E1^E4蛋白的相關(guān)研究報(bào)道更是缺乏，準(zhǔn)確獲得其全部表位信息對(duì)宮頸癌診斷、疫苗和抗體藥物的研發(fā)具有參考作用。
　　我們首先從生物信息學(xué)的角度對(duì)E1^E4蛋白進(jìn)行了分析，E1^E4是一個(gè)親水性蛋白，內(nèi)部有幾個(gè)親水性較高的區(qū)域，在溶液中不穩(wěn)定。利用現(xiàn)有的B細(xì)胞表位預(yù)測(cè)算法（親水性算法、可及性算法、可塑性算法、二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)算法）和軟件(ABCpred、BepiPred)對(duì)HPV58型E1^E4蛋臼B細(xì)胞線性表位進(jìn)行預(yù)測(cè)，在對(duì)不同算

3、法預(yù)測(cè)的B細(xì)胞線性表位結(jié)果進(jìn)行整合時(shí)，我們發(fā)現(xiàn)這些結(jié)果有一定的一致性，分析出了該蛋白可能的B細(xì)胞線性表位所在區(qū)域，從整體上對(duì)HPV58型E1^E4蛋白B細(xì)胞表位有了大致認(rèn)識(shí)。
　　我們對(duì)HPV58型E1^E4蛋白進(jìn)行了原核表達(dá)、純化，并免疫三只雄性新西蘭白兔，獲得了其抗血清。隨后，我們采用了改良的生物合成肽法，使用pXXGST-1短肽表達(dá)載體合成了13條覆蓋整個(gè)HPV58 E1^E4蛋白并相互重疊9個(gè)氨基酸的15肽，利用制備的E1