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1、為構(gòu)建豬繁殖與呼吸綜合征(Porcine Reproductive and Respiratory Sydrome，PRRS)和豬2型圓環(huán)病毒病(Porcine Circovirus type 2 disease，PCV2)的二聯(lián)基因疫苗，將PRRSV長春分離株的ORF5、ORF3基因和PCV2內(nèi)蒙古分離株的ORF2基因，分別克隆至真核表達(dá)載體pIPES啟動子CMV下游，構(gòu)建成真核表達(dá)質(zhì)粒pIRES-ORF2-ORF5、pIPES-OR
2、F2-ORF5-ORF3。通過Western blotting以及IFA等檢測證明，所構(gòu)建的2個重組DNA疫苗質(zhì)粒中的目的基因在真核細(xì)胞能進(jìn)行有效的轉(zhuǎn)錄，并表達(dá)了目的蛋白。 將所構(gòu)建的2個重組DNA疫苗質(zhì)粒免疫Balb/c小鼠，檢測了免疫小鼠的ELISA抗體水平、脾T淋巴細(xì)胞亞群數(shù)量和病毒特異性γ干擾素產(chǎn)生細(xì)胞的數(shù)量。結(jié)果表明，所構(gòu)建的2個核酸疫苗pIPES-ORF2-ORF5和pIPES-ORF2-ORF5-ORF3均能有效刺
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