AJSAF對(duì)豬繁殖與呼吸綜合征疫苗的佐劑作用.pdf

1、豬繁殖與呼吸綜合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS)是當(dāng)前影響世界養(yǎng)豬業(yè)最重大的傳染性疾病，給世界養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。接種疫苗是目前控制PRRS發(fā)生和傳播唯一可行的措施。而當(dāng)前商業(yè)化的PRRS病毒(PRRSV)疫苗存在誘導(dǎo)的免疫應(yīng)答遲緩以及免疫保護(hù)性弱等弊端，對(duì)PRRSV感染不能提供完全的免疫保護(hù)。為改善疫苗的免疫效力，需要在疫苗中添加佐劑聯(lián)合使用。
　

2、　合歡皮皂苷(AJSAF)是從合歡皮中提取純化得到的佐劑活性有效部位。前期實(shí)驗(yàn)證明，AJSAF能顯著增強(qiáng)模式抗原卵清蛋白(Ovalbumin，OVA)和禽流感雞痘病毒載體活疫苗(rFPV)受免小鼠抗原特異性細(xì)胞免疫和體液免疫應(yīng)答，并能同時(shí)誘導(dǎo)Th1/Th2免疫反應(yīng)。同時(shí)，AJSAF的毒性和溶血性比Quil A低。因此，AJSAF是一種理想的候選疫苗佐劑。本實(shí)驗(yàn)以小鼠為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，評(píng)價(jià)AJSAF對(duì)豬繁殖與呼吸綜合征弱毒活疫苗(CH-1R株)

3、、高致病性豬繁殖與呼吸綜合征弱毒活疫苗(JXA1-R株)和豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗(CH-1R株)三種疫苗的佐劑作用，并初步探討其作用機(jī)制。
　　1.AJSAF對(duì)豬繁殖與呼吸綜合征弱毒活疫苗的佐劑作用
　　豬繁殖與呼吸綜合征弱毒活疫苗(CH-1R株)(CH-1R MLV)單獨(dú)或聯(lián)合不同劑量的AJSAF(5、10、20μg)皮下免疫雌性BALB/c小鼠，兩周后加強(qiáng)免疫，二免后14天處死小鼠，采集血液分離血清，剖取脾臟制備單細(xì)

4、胞懸液，測(cè)定各項(xiàng)免疫學(xué)指標(biāo)。結(jié)果表明:AJSAF不僅能顯著增強(qiáng)CH-1R MLV受免小鼠中PRRSVN蛋白特異性IgG、IgG1、IgG2a和IgG2b抗體滴度(P＜0.001)，也能增強(qiáng)由ConA、LPS和PRRSVN蛋白刺激的脾細(xì)胞增殖反應(yīng)、PRRSVN蛋白所誘導(dǎo)的遲發(fā)型超敏反應(yīng)以及自然殺傷細(xì)胞(NK cells)的殺傷活性(P＜0.05，P＜0.01orP＜0.001)。AJSAF能顯著誘導(dǎo)CH-1R MLV受免小鼠脾細(xì)胞中IFN

5、-γ和IL-10的分泌以及上調(diào)Th1和Th2型細(xì)胞因子(IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ)和轉(zhuǎn)錄因子(STAT4、STAT6、T-bet和GATA-3)的mRNA表達(dá)水平(P＜0.05,P＜0.01orP＜0.001)。AJSAF也能增加受免小鼠脾細(xì)胞中PRRSV N蛋白特異性Th1(IL-2+和INF-γ+)和Th2(IL-4+和IL-10+)CD4T細(xì)胞比率以及Tc1(IL-2+和INF-γ+)和Tc2(IL-4+和IL-

6、10+)CD8T細(xì)胞比率(P＜0.05orP＜0.01)。
　　2.AJSAF對(duì)高致病性豬繁殖與呼吸綜合征弱毒活疫苗的佐劑作用
　　高致病性豬繁殖與呼吸綜合征弱毒活疫苗(JXA1-R株)(JXA1-R MLV)單獨(dú)或聯(lián)合不同劑量的AJSAF(5、10、25、50μg)皮下免疫雌性ICR小鼠，兩周后加強(qiáng)免疫。采用間接ELISA法檢測(cè)二免后兩周小鼠血清中PRRSVN蛋白特異性IgG、IgG1、IgG2a和IgG2b的抗體滴度。結(jié)

7、果表明，AJSAF(5、10、25、50μg)能顯著增強(qiáng)JXA1-R MLV受免小鼠血清中PRRSVN蛋白特異性IgG、IgG1、IgG2a和IgG2b抗體滴度(P＜0.05，P＜0.01orP＜0.001)，說(shuō)明AJSAF能顯著增強(qiáng)JXA1-R MLV受免小鼠的體液免疫反應(yīng)。
　　3.AJSAF對(duì)豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗的佐劑作用
　　豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗(CH-1R株)(CH-1R IAV)單獨(dú)或聯(lián)合不同劑量的A

8、JSAF(5、10、25、50μg)皮下免疫雌性ICR小鼠，兩周后加強(qiáng)免疫。采用間接ELISA法檢測(cè)二免后兩周小鼠血清中PRRSVN蛋白特異性IgG、IgG1、IgG2a和IgG2b的抗體滴度。結(jié)果表明，AJSAF(5、10、25、50μg)能顯著增強(qiáng)CH-1R IAV受免小鼠血清中PRRSVN蛋白特異性IgG、IgG1、IgG2a和IgG2b抗體滴度(P＜0.05，P＜0.01or P＜0.001)。說(shuō)明AJSAF能顯著增強(qiáng)CH-1R