子宮內(nèi)膜癌SREBP1表達及SREBP1 shRNA對內(nèi)膜癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響.pdf

1、研究目的:
　　 子宮內(nèi)膜癌是女性生殖道三大惡性腫瘤之一，近年來發(fā)病率在世界范圍內(nèi)呈上升趨勢。腫瘤組織的惡性生物學(xué)行為與其特殊的物質(zhì)代謝和能量代謝密切相關(guān)。脂肪酸在惡性腫瘤中的代謝研究始于20世紀(jì)90年代，顯著增加的脂肪酸合成是腫瘤細(xì)胞快速增殖的一個重要標(biāo)志。大多數(shù)正常細(xì)胞從血液循環(huán)中獲得所需脂肪酸，而腫瘤細(xì)胞則自身從頭合成至少90％的脂肪酸，并且不受正常細(xì)胞對脂肪酸合成途徑的調(diào)節(jié)。由SREBF1基因編碼的固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白(

2、SterolRegulatoryElementBindingProtein，SREBP)是脂肪生成基因的主要調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄因子，在多種惡性腫瘤中過度表達，如結(jié)腸癌、乳腺癌、前列腺癌和肝癌，但是其在子宮內(nèi)膜癌組織中的作用卻知之甚少。因此，本研究采用免疫組織化學(xué)染色方法檢測SREBP1在正常子宮內(nèi)膜和子宮內(nèi)膜癌組織中的表達情況，探討其與子宮內(nèi)膜癌臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系，并通過短發(fā)夾RNA(shorthairpinRNA，shRNA)干擾技術(shù)探討S

3、REBP1對低分化子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞株AN3-CA生物學(xué)行為的影響，從而為子宮內(nèi)膜癌的靶向治療提供新思路。
　　 研究方法:
　　 采用組織芯片技術(shù)和免疫組織化學(xué)染色方法分別檢測了52例增殖期、56例分泌期和51例絕經(jīng)后期正常子宮內(nèi)膜，18例復(fù)雜增生子宮內(nèi)膜，11例不典型增生子宮內(nèi)膜以及120例子宮內(nèi)膜癌組織及41例相應(yīng)癌旁正常子宮內(nèi)膜SREBP1的表達及其細(xì)胞定位情況;用實時熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)和蛋白免疫印跡方法分別

4、檢測五株子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系中SREBP1及其靶基因mRNA和蛋白水平的表達，選定低分化子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞AN3-CA構(gòu)建SREBP1shRNA穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系，通過細(xì)胞增殖實驗、細(xì)胞周期實驗、Transwell細(xì)胞侵襲實驗、凋亡實驗、細(xì)胞集落形成實驗、裸鼠移植瘤試驗等方法分析SREBP1shRNA對子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞AN3-CA生物學(xué)行為的影響。
　　 研究結(jié)果:
　　 (1)SREBP1在下常子宮內(nèi)膜增殖期、分泌期和絕經(jīng)后期子宮

5、內(nèi)膜中表達呈降低趨勢，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);
　　 (2)SREBP1在癌旁正常子宮內(nèi)膜中低表達且主要定位于胞漿，而在子宮內(nèi)膜癌組織中高表達并定位于胞漿和胞核，胞漿、胞核及整體組織免疫組織化學(xué)染色H-Score評分在癌旁正常子宮內(nèi)膜和子宮內(nèi)膜癌組織之間都存在顯著性差異(P＜0.05);
　　 (3)SREBP1在高、中、低分化子宮內(nèi)膜癌組織中表達呈上升趨勢，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);
　　

6、 (4)與對照組相比，SREBP1shRNA可減慢子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞AN3-CA的增殖速度，降低AN3-CA細(xì)胞的侵襲能力和集落形成能力，誘導(dǎo)AN3-CA細(xì)胞凋亡，并抑制裸鼠移植瘤形成能力，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，但對細(xì)胞周期的影響無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 研究結(jié)論:
　　 (1)SREBP1在子宮內(nèi)膜癌中過度表達，并與腫瘤組織分化程度相關(guān)，其在子宮內(nèi)膜癌中的過表達與活化可能參與子宮內(nèi)膜癌的進展;