孕激素對(duì)子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細(xì)胞TGF-β1、TβR1表達(dá)的影響.pdf

1、目的：本課題以高分化子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細(xì)胞株為研究對(duì)象,通過(guò)對(duì)孕酮(MPA)作用后子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細(xì)胞的增殖、凋亡的檢測(cè)以及TGF-β1及其受體的表達(dá)情況的測(cè)定,觀察MPA對(duì)人子宮內(nèi)膜高分化腺癌細(xì)胞株Ishikawa細(xì)胞中TGF-β1、TβR1蛋白表達(dá)的影響,探討孕酮作用與Ishikawa細(xì)胞TGF-β1、TβR1蛋白表達(dá)及細(xì)胞凋亡之間的關(guān)系,為孕激素治療子宮內(nèi)膜癌的效應(yīng)途徑提供一定理論依據(jù),并且為子宮內(nèi)膜癌的孕激素治

2、療提供新的思路。
　　 方法:常規(guī)方法體外培養(yǎng)人子宮內(nèi)膜高分化腺癌細(xì)胞株Ishikawa細(xì)胞,細(xì)胞隨機(jī)分組,實(shí)驗(yàn)組分別以含不同濃度MPA(2.5μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、15μg/ml、20μg/ml)的培養(yǎng)液進(jìn)行處理,對(duì)照組加入不含MPA的培養(yǎng)液,MTT法觀察Ishikawa細(xì)胞在MPA作用不同時(shí)間梯度(24h、48h及72h)及濃度梯度(2.5μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、15μg/ml、20μg

3、/ml)下的增殖情況;流式細(xì)胞儀(FCM)檢測(cè)Ishikawa,細(xì)胞在MPA作用72h后不同濃度梯度(5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml)下的凋亡率;鏈霉素抗生物素蛋白-過(guò)氧化物酶連接(SP)法測(cè)定Ishikawa細(xì)胞在MPA作用72h后不同濃度梯度(5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml)下細(xì)胞中TGF-β1、TβR1蛋白的表達(dá)。
　　 結(jié)果:MPA呈時(shí)間及劑量依賴性抑制Ishikawa細(xì)胞增殖(P＜0.05)

4、;與對(duì)照組相比,MPA處理組細(xì)胞凋亡率上升(P＜0.01);TGF-β1在Ishikawa細(xì)胞中有強(qiáng)表達(dá),MPA作用72h后,其表達(dá)明顯減弱(P＜0.01),TβR1蛋白在Ishikawa細(xì)胞中有弱表達(dá),MPA作用72h后,TβR1蛋白在Ishikawa細(xì)胞中的表達(dá)明顯增強(qiáng)(P＜0.01)。
　　 結(jié)論:孕激素可抑制子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細(xì)胞增殖促進(jìn)其凋亡,并降低細(xì)胞中TGF-β1的表達(dá),增強(qiáng)TβR1蛋白的表達(dá)。