我國布-加綜合征JAK2外顯子點突變的研究及病例信息分析.pdf

1、目的：通過分析徐州及周邊地區(qū)布-加綜合征(BCS)患者JAK2外顯子14中V617F點突變的發(fā)生率，在此基礎上測定JAK2外顯子12中547insL+I540-F47dup8、I540-N542delins、N542-E543del、E543-D544del、K539L、H538QK539L及F537-K539delinsL點突變的發(fā)生情況，為我國BCS的病因?qū)W研究提供新思路，為闡明BCS的發(fā)病機制和BCS的鑒別診斷及靶向治療提供新方向

2、。通過現(xiàn)場流行病學調(diào)查結(jié)合分析病例組病人一般資料和臨床資料，為針對BCS的診斷、治療、預后提供參考依據(jù)。
　　方法：本次研究采用實驗室病因?qū)W研究、現(xiàn)場流行病學調(diào)查、病案分析相結(jié)合的方法。收集2010年7月至2011年8月徐州醫(yī)學院附屬醫(yī)院介入科經(jīng)確診并住院的BCS患者120例作為病例組，同時篩選此期間徐醫(yī)附屬醫(yī)院體檢中心在年齡上與病例組相匹配的120例健康體檢者作為對照組。對病例組和對照組每個研究對象各抽取外周靜脈血2ml，從全血

3、中提取DNA，設計引物，應用等位基因特異性聚合酶鏈式反應(AS-PCR)檢測每個研究對象JAK2V617F、547insL+I540-F47dup8、I540-N542delinS、N542-E543del、E543-D544del、K539LH538QK539L及F537-K539delinsL共八個位點的突變情況，對突變陽性者進行實時定量PCR再次確定，并對所有陽性樣本和隨機抽取的部分陰性樣本進行DNA擴增純化后測序驗證。每確診一例

4、BCS的同時即對其進行面對面的流行病學調(diào)查。跟蹤收集病例組和對照組完整的病歷資料和各項實驗室檢查指標。建立數(shù)據(jù)庫并進行統(tǒng)計分析。
　　結(jié)果：1.病例組資料特點：患者年齡主要集中于30-50歲之間，職業(yè)多為農(nóng)民，文化水平普遍偏低，經(jīng)濟狀況以貧困為主。本次研究的120例BCS患者中下腔靜脈型占42.5％(51/120)，混合型占40.0％(48/120)，肝靜脈型僅占17.5％(21/120)，符合中國BCS的病理類型分布特點。2.實

5、驗室檢查指標：病例組和對照組的血常規(guī)、生化檢測(肝功能項目)、癌抗原檢查的各項指標經(jīng)比較均為P<0.05，差異有統(tǒng)計學意義。3.突變檢測結(jié)果：經(jīng)AS-PCR檢測出10例BCS患者存在JAK2V617F點突變，同時進行實時定量PCR和測序驗證后結(jié)果一致，經(jīng)統(tǒng)計學檢驗病例組與對照組差異有統(tǒng)汁學意義。JAK2外顯子12中K539L點存在5例突變，經(jīng)統(tǒng)計學檢驗病例組與對照組差異無統(tǒng)計學意義。JAK2外顯子12中其它6個位點在病例組和對照組中均未