缺鐵脅迫下小金海棠根部鐵高效相關(guān)蛋白的表達(dá)及其屬性鑒定.pdf

1、鐵是植物生長(zhǎng)發(fā)育所必需的營(yíng)養(yǎng)元素之一。雖然地殼中含鐵豐富，但絕大多數(shù)的植物缺乏從土壤中有效吸收鐵的活性機(jī)制，因而會(huì)表現(xiàn)出缺鐵脅迫癥狀。缺鐵將嚴(yán)重影響植物的生長(zhǎng)發(fā)育，為研究耐缺鐵植物的抗缺鐵機(jī)制，解決植物缺鐵黃化的問(wèn)題，本研究以耐缺鐵的蘋果屬植物小金海棠(Malus xiaojinensis Cheng et Jiang)為試材，通過(guò)蛋白質(zhì)組學(xué)的技術(shù) (雙向電泳技術(shù)，質(zhì)譜技術(shù)，生物信息學(xué)技術(shù))手段研究缺鐵脅迫下小金海棠根部蛋白質(zhì)表達(dá)模式的

2、變化情況，分離與鑒定其鐵高效相關(guān)蛋白，以探明其耐缺鐵的機(jī)理。將組培生根的小金海棠進(jìn)行24小時(shí)和72小時(shí)的缺鐵處理(0 μmol/L FeNa-EDTA)，以全營(yíng)養(yǎng)液培養(yǎng)(含40 μmol/L FeNa-EDTA)為對(duì)照。選取白色的初生根，采用改良的TCA/丙酮法進(jìn)行總蛋白的提取。利用雙向凝膠電泳技術(shù)對(duì)根部總蛋白樣品進(jìn)行分離，共得到700多個(gè)重復(fù)性好的蛋白點(diǎn)。對(duì)其中17個(gè)上調(diào)表達(dá)的蛋白點(diǎn)進(jìn)行了MALDI-TOF質(zhì)譜分析。用獲得的肽質(zhì)量指紋

3、圖譜數(shù)據(jù)進(jìn)行蛋白質(zhì)的檢索與鑒定，共有13個(gè)蛋白質(zhì)得到了鑒定。這些蛋白分屬于11個(gè)基因的表達(dá)產(chǎn)物。這些與小金海棠鐵高效相關(guān)的蛋白大多數(shù)為物質(zhì)與能量代謝和抗逆與脅迫應(yīng)答反應(yīng)有關(guān)的蛋白，還有些蛋白是細(xì)胞骨架蛋白和參與膜轉(zhuǎn)運(yùn)的蛋白。與物質(zhì)和能量代謝有關(guān)的蛋白有UDP-葡萄糖焦磷酸化酶，果糖激酶和NAD依賴的異檸檬酸脫氫酶。在基礎(chǔ)代謝中具有重要作用的S-腺苷甲硫氨酸合成酶也得到了鑒定；與抗逆境脅迫有關(guān)的蛋白有單脫氫抗壞血酸還原酶，維生素B6合成蛋