五步蛇毒纖溶酶FⅡa抗小鼠DIC的量效關系研究.pdf

1、彌散性血管內(nèi)凝血(DIC)是許多危重癥疾病發(fā)展過程中的一種復雜的病理過程，是一組嚴重的出血性綜合征。發(fā)病機理主要為血管內(nèi)皮受損、組織損傷、紅細胞及血小板損傷釋放促凝物質和其他促凝物質入血，激活和啟動內(nèi)源、外源凝血系統(tǒng)，使體內(nèi)凝血和抗凝機制失衡，導致彌漫性小血管內(nèi)血栓形成和多器官功能障礙。臨床表現(xiàn)為出血、微循環(huán)功能障礙、溶血及微血栓。急性型尤為兇險，如不及時診治，可危及生命。
　　 對于DIC，目前的治療方法和療效都很有限。常用藥

2、物主要有兩類：抗凝藥如肝素和纖溶酶原激活物，如尿激酶和組織型纖溶酶原激活物(t-PA)。然而這些藥物嚴重的出血副作用限制了它們的廣泛應用，并且臨床上這些藥物并不能有效的降低DIC的死亡率。因此，尋找一種新的能有效抑制、延緩DIC發(fā)展，同時又無出血傾向的高效低副作用的治療藥物已經(jīng)成為當務之急。
　　 五步蛇毒纖溶酶FIIa是本實驗室前期從五步蛇毒粗毒中分離純化得到的，研究證實，F(xiàn)IIa在多種血栓模型能直接溶解血栓，效果良好；在溶栓

3、的同時，組織學檢查未見出血反應；溶解纖維蛋白原的作用比尿激酶弱，同時還有一定的抗凝作用及抗血小板聚集作用。強烈支持五步蛇毒纖溶酶FIIa可以成為新的高效的抗DIC藥物。本實驗即對FIIa在DIC動物模型上的治療效果進行探討。
　　 目的：
　　 研究FIIa對于LPS誘導的DTC治療作用的量效關系并探討其可能機制，為FIIa作為DIC治療藥物提供科學的實驗室依據(jù)。
　　 方法：
　　 1.利用腹腔內(nèi)注射L

4、PS在小鼠身上誘導DIC，建立小鼠DIC死亡模型，觀察不同劑量的FIIa對DIC小鼠24小時生存率的影響。
　　 2.取DIC各治療組小鼠的腎臟做病理切片，觀察FIIa對DIC小鼠病理的影響。
　　 3.用Astrup T.和Mullertz S.的纖維平板法測定FIIa對纖維蛋白的作用。用加熱纖維平板法研究FIIa溶解纖維蛋白的作用是否依賴纖溶酶原。
　　 4.按Rong Gao和Manjunatha的方法研究

5、FIIa對纖維蛋白原的作用。按照Kondo的方法，研究FIIa出血活性的強弱。
　　 結果：
　　 1.LPS模型組小鼠24H生存率為20％，肝素治療組為30％，F(xiàn)IIa3.125 mg/kg組為40％，F(xiàn)IIa6.250mg/kg組為50％，F(xiàn)IIa12.500mg/kg組為80％，F(xiàn)lla各劑量組與模型組比較，差異具有統(tǒng)計學意義。以FIIa劑量的對數(shù)值對小鼠24H生存率做圖，得回歸方程y=66.439x+3.7895

6、，相關系數(shù)R2=0.9231，呈現(xiàn)出正相關的直線關系。
　　 2.LPS模型組小鼠腎臟病理切片可見廣泛的血栓形成，炎性細胞浸潤，近曲小管內(nèi)管腔消失，管壁上皮細胞嚴重變性、壞死脫落。肝素組血栓多見，腎小管上皮細胞腫脹及纖維蛋白滲出明顯。在FIIa3.125mg/kg組，微血栓形成減少，仍有纖維蛋白滲出和炎性細胞聚集。FIIa6.250mg/kg組血栓少見，有極少量纖維蛋白滲出，腎小球小管形態(tài)接近正常。FIIa12.500mg/kg

7、組上述病理改變明顯改善，腎小球，小管形態(tài)基本正常，未見血栓形成及纖維蛋白滲出。
　　 3.FIIa能夠直接降解纖維蛋白(原)，其溶纖活性不依賴纖溶酶原的存在。FIIa能夠降解凝血因子II、X，出血活性小。最小出血劑量(MHD)為，屬于非出血性纖溶酶。
　　 結論：
　　 五步蛇毒纖溶酶FIIa能夠提高DIC小鼠的24小時生存率，隨劑量的增加呈現(xiàn)量效關系，似與腎臟微血栓形成及纖維蛋白滲出的減少有相關性。其機制可能與