四君子湯藥物血清對人胃癌細胞株BGC-823、SGC-7901側群細胞生物學特性的影響.pdf

1、本文分析了四君子湯藥物血清對人胃癌細胞株BGC-823、SGC-7901側群細胞生物學特性的影響。本研究分為三個部分：
　　第一部分：人胃癌細胞株BGC-823、SGC-7901側群細胞檢測及分選。
　　目的：檢測胃癌細胞株中的SP細胞比例，并分選出SP細胞。
　　方法：選擇低、中分化程度的人胃癌細胞株BGC-823、SGC-7901,應用流式細胞儀熒光激活分選法，以Hoechst33342染色，維拉帕米拮抗對照，檢測

2、2株人胃癌細胞株中的SP細胞比例，并分選出SP細胞。
　　結果：BGC-823 SP細胞比例為2.60％±1.25%，SGC-7901 SP細胞比例為2.53%±0.85%。
　　結論：人胃癌細胞株BGC-823、SGC-7901中存在一定數(shù)量的SP細胞，且可被分選，不同分化程度的腫瘤細胞SP細胞的比例存在一定的差異。
　　第二部分：人胃癌細胞BGC-823、SGC-7901側群細胞的生物學鑒定。
　　目的：從體

3、外增殖活力、侵襲能力、成瘤能力等方面對分選出的人胃癌SP細胞進行生物學特征的初步鑒定，探討以SP細胞作為腫瘤干細胞研究切入點的可行性。
　　方法：通過細胞生長曲線（CCK-8法）、平板克隆形成實驗比較SP細胞與NSP細胞及未分選細胞的體外增殖活力；應用細胞侵襲transwell試驗比較胃癌SP與NSP及未分選細胞的侵襲能力差異；應用異種移植NOD/ SCID小鼠成瘤實驗比較胃癌SP與NSP細胞及未分選細胞的體內成瘤能力差異；通過胃

4、癌SP體內成瘤細胞分化現(xiàn)象鑒定其多向分化特性。
　　結果：細胞生長曲線顯示，BGC-823及SGC-7901 SP細胞的增殖能力明顯高于NSP細胞及未分選細胞（P<0.05）。平板克隆實驗結果顯示，BGC-823及SGC-7901 SP細胞克隆形成率大于大于NSP及未分選細胞(P＜0.05)。Transwell細胞侵襲實驗顯示，BGC-823及SGC-7901 SP細胞侵襲力小于NSP細胞及未分選細胞（P＜0.05）。異種移植瘤實

5、驗結果顯示，BGC-823及SGC-7901 SP細胞在最早成瘤時間、瘤體生長曲線及最終成瘤重量上均顯示出較NSP細胞及未分選細胞強的成瘤能力。胃癌SP細胞與NSP細胞及未分選細胞成瘤后，均可轉化成不同分化程度的胃癌細胞。
　　結論：人胃癌細胞株BGC-823、SGC-7901的SP細胞具有較NSP細胞及未分選細胞強的體外增殖活力、成瘤能力，侵襲力較弱，具有多向分化特性，符合腫瘤干細胞特性，SP細胞富集腫瘤干細胞，可以作為腫瘤干細

6、胞研究的切入點。
　　第三部分：四君子湯藥物血清對人胃癌細胞株BGC-823、SGC-7901側群細胞生物學特性的影響。
　　目的：從體外增殖活力、成瘤能力研究四君子湯藥物血清干預后對人胃癌SP細胞生物學特性的影響，為中藥四君子湯在胃癌的治療及相關應用提供客觀的實驗及理論依據(jù)。
　　方法：制作動物藥物血清，高效液相色譜分析法檢測血清藥效濃度，藥物血清干預胃癌SP細胞后通過細胞生長曲線（CCK-8法）、平板克隆形成實驗比

7、較對體外增殖活力的影響，應用異種移植NOD/ SCID小鼠成瘤實驗比較對體內成瘤能力的影響。
　　結果：高效液相色譜分析法顯示藥物血清存在人參皂甙Rg1的藥效成分，細胞生長曲線顯示，經藥物血清干預后BGC-823、SGC-7901的SP及NSP組細胞增殖活力低于未經干預組細胞（P＜0.05），異種移植瘤實驗結果顯示，經藥物血清干預后BGC-823、SGC-7901的SP及NSP組細胞在瘤體生長曲線及最終成瘤重量上顯示出較未經干預細