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文檔簡介
1、目的:
通過研究miR-491-5p與DAT基因mRNA3’UTR VNTR相互作用,探討其調控DAT表達對藥物成癮性的影響。
方法:
用生物信息學方法預測可能與DAT基因mRNA3’UTR VNTR序列有相互作用的miRNA;采用雙熒光素酶報告基因技術驗證miR-491-5p與DAT基因mRNA3’UTR VNTR序列的相互作用;采用逆轉錄實時熒光定量PCR和蛋白免疫印跡技術觀察miR-491-5p對DA
2、T基因mRNA和蛋白質表達水平的影響;并用ELISA技術檢測miR-491-5p對DAT介導的神經(jīng)細胞多巴胺轉運功能的影響。
結果:
生物信息學方法預測到miR-491-5p與DAT VNTR有相互作用;雙熒光素酶報告基因系統(tǒng)檢測證實了miR-491-5p與DAT VNTR有相互作用;逆轉錄實時熒光定量PCR和蛋白免疫印跡技術顯示,miR-491-5p能夠顯著抑制SK-N-SH細胞DAT基因mRNA和蛋白質的表達水平
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