功能納米材料抑制癌細胞生長和促進癌細胞凋亡的研究.pdf

1、納米材料對本世紀一系列高新技術的產生與發(fā)展都具有重要的影響，在藥物研究領域的熱點問題亦是如此——利用納米材料特殊的表面效應、量子尺寸效應等特點，在藥物輸送作用中將實現(xiàn)器官靶向、高效輸送和低毒等方面的重大突破。因此，納米藥物的研究已經成為現(xiàn)代醫(yī)學發(fā)展的重要方向之一，也是藥物創(chuàng)新的一個重要領域。惡性腫瘤(癌癥)是僅次于心腦血管疾病，威脅人類健康的疾病殺手之一，至今尚未發(fā)現(xiàn)有特效的治療方法。在本論文的工作中，我們研究和揭示了功能Fe3O4納米

2、顆粒，石墨烯納米復合物和量子點納米顆粒等在抑制體外癌細胞生長及促進癌細胞凋亡的協(xié)同作用，并對其作用機理進行了討論。同時，構建了腫瘤裸鼠模型，尾靜脈給藥對抑制裸鼠腫瘤生長和促凋亡機制進行了研究和探討。
　　 本論文的主要研究內容如下:
　　 1)納米復合物的合成及其表征
　　 本論文中我們設計合成了功能Fe3O4納米顆粒及兩種載藥磁性納米顆粒;CdTe量子點納米顆粒;同時合成金納米顆粒并自組裝獲得石墨烯—金納米復合

3、物;設計了納米級二茂鐵—碳硼烷衍生物。
　　 2)腫瘤細胞，腫瘤裸鼠模型的建立
　　 通過細胞試驗研究了相關納米復合物與敏感白血病K562細胞和耐藥白血病KA細胞，人類非小細胞肺癌HCC827細胞，以及人肝癌耐藥HepG2細胞的相互作用;并且建立了相關腫瘤裸鼠模型，研究了動物抗癌活性實驗。
　　 3)納米復合物促癌細胞凋亡
　　 首先利用MTT的方法研究相關納米復合物對癌細胞的殺傷作用，以及顯著抑制癌細胞

4、增殖的協(xié)同作用。納米復合物作用癌細胞后，進一步進行了AO/EB熒光染色，并在熒光顯微鏡下觀察凋亡了細胞形態(tài)，采用流式細胞儀計算了癌細胞凋亡率。經納米復合物處理過的癌細胞凋亡后的DNA斷裂形成長度相差約為200bp的DNA梯度片段，經瓊脂糖凝膠電泳顯示為階梯狀凋亡DNAfragmentation。同時，我們利用Western印跡方法進一步研究了納米復合物對癌細胞的促凋亡作用的分子機理，結果表明納米復合物通過活化細胞凋亡的關鍵蛋白Caspa

5、se8，9等上游凋亡蛋白，活化了細胞凋亡執(zhí)行蛋白Caspase7，3，而活化的Caspase7，3接著活化了PARP，導致DNA修復的抑制，并啟動DNA的降解。與此同時，相關納米復合物顯著降低了癌細胞緊密連接蛋白和P-糖蛋白的表達。在此基礎上，我們構建了腫瘤裸鼠模型，并且通過尾靜脈注射協(xié)同藥物來抑制裸鼠的腫瘤生長，并通過對腫瘤組織切片DNA缺口末端標記(TUNEL)檢測。
　　 研究結果表明，相關納米復合物如磁性Fe3O4納米顆