酸棗仁中乙酰膽堿酯酶抑制劑的篩選研究.pdf

1、阿爾茨海默病(Alzheimer's disease，AD)是癡呆癥中一種中樞神經(jīng)退行性和致命性疾病，主要發(fā)病于老年人中，常見(jiàn)臨床癥狀表現(xiàn)為認(rèn)知障礙、失憶、失眠和躁動(dòng)等。同時(shí)由于全球人口老齡化加劇，該疾病已達(dá)到流行病的程度，帶來(lái)了嚴(yán)重的社會(huì)和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。
　　 到目前為止，關(guān)于AD的發(fā)病機(jī)制的假說(shuō)有很多種，且并未統(tǒng)一，但在眾多的假說(shuō)當(dāng)中，受到廣泛認(rèn)同的主要有β-淀粉樣蛋白假說(shuō)和膽堿能假說(shuō)。這兩種假說(shuō)都認(rèn)為AD的形成與乙酰膽堿酯酶(

2、Acetylcholinesterase，AChE)有密切聯(lián)系。因此，目前國(guó)際上治療AD的有效手段主要是通過(guò)用藥物抑制AD病人腦內(nèi)AChE的活性，以間接達(dá)到增加腦內(nèi)乙酰膽堿(Acetylcholine，ACh)的含量的目的。由此可見(jiàn)，對(duì)于乙酰膽堿酯酶抑制劑(Acetylcholinesterase inhibitor，AChEI)的研究顯得尤為重要。迄今為止，研究者們已經(jīng)從植物中篩選出幾種有效的AChEI，如石杉?jí)A甲、加蘭他敏、毒扁豆堿

3、等。這也提示我們，可以從植物藥中篩選出具有抗AChE活性的潛在藥物。
　　 酸棗仁是中南亞地區(qū)應(yīng)用最廣泛的藥材之一，主要化學(xué)活性成分為黃酮、酸棗仁皂苷及生物堿等。大量研究表明其具有鎮(zhèn)靜催眠、抗焦慮、抗驚厥的功效，但其鮮少用于AD的治療。近年來(lái)的研究發(fā)現(xiàn)酸棗仁中的活性成分對(duì)與AD有關(guān)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)如遞質(zhì)、受體等有著明顯的影響作用，但關(guān)于酸棗仁中抗AChE的活性成分卻鮮有報(bào)道。因此，本文針對(duì)酸棗仁抑制AChE活性的作用進(jìn)行了研究。<

4、br>　　 首先，優(yōu)化和改進(jìn)了酸棗仁活性成分的HPLC測(cè)定方法和AChE活性測(cè)定方法，確定了各種必需的參數(shù)，為從酸棗仁中篩選AChEI提供了實(shí)驗(yàn)條件，奠定了篩選基礎(chǔ)。
　　 其次，對(duì)酸棗仁中有效成分的提取分離條件進(jìn)行了優(yōu)化，確定了酸棗仁有效成分的最佳提取方法為:70％乙醇，料液比1∶30，超聲提取50 min，提取兩次。
　　 最后，對(duì)酸棗仁抗AChE活性進(jìn)行了測(cè)試，確定酸棗仁具有抑制AChE活性的作用，并從中篩選出對(duì)

5、AChE活性具有抑制作用的兩個(gè)化合物，通過(guò)結(jié)合GC-MS、13C-NMR、1H-NMR等現(xiàn)代波譜光譜技術(shù)，參照相關(guān)文獻(xiàn)及與標(biāo)準(zhǔn)品譜圖的對(duì)比鑒定為亞油酸和油酸，IC50值分別為18.17±1.86和12.01±1.15μg·mL-1。
　　 本文的研究工作首次證明了酸棗仁具有抑制乙酰膽堿酯酶活性的作用，并從酸棗仁中篩選出了兩個(gè)具有AChE抑制活性的物質(zhì)，雖然其只顯示了中等活性的AChE抑制作用，但這是首次確定這兩個(gè)物質(zhì)對(duì)AChE的