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文檔簡介
1、目的:探討MAD2B在高糖誘導的腎小球內(nèi)皮細胞損傷中的作用。
方法:體外培養(yǎng)小鼠腎小球內(nèi)皮細胞,Western Blot檢測高糖(30mM)刺激下不同時間點MAD2B蛋白的表達;脂質(zhì)體法將重組質(zhì)粒MAD2B shRNA和scrambled shRNA轉染GEnC,實驗分為對照組、高糖組、高糖+scramble組、高糖+MAD2B shRNA組,檢測各組細胞的凋亡率、增殖活力、NO生成水平以及單層細胞的通透性。
結果:
2、高糖刺激腎小球內(nèi)皮細胞MAD2B的表達量明顯升高;脂質(zhì)體法轉染MAD2B shRNA,顯著抑制MAD2B的表達;和對照組相比,高糖組凋亡率升高,而MAD2B shRNA干預組凋亡減輕;高糖刺激48h細胞增殖活力減弱,但高糖+shRNA組與高糖+scramble組相比細胞活力較高;高糖刺激24h、48h細胞生成NO水平較對照組降低,但高糖+shRNA組較高糖+scramble組NO分泌較多;高糖組單層細胞通透性升高,MAD2B shRNA
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