不同再灌注-缺血時間間隔的缺血后處理對兔睪丸缺血再灌注損傷的影響.pdf

1、目的：探討不同再灌注/缺血時間間隔的缺血后處理對急性單側睪丸不同程度缺血后再灌注損傷的影響和相關機制。
　　 方法：54只成年新西蘭大白兔隨機分成9組,每組6只:對照組(S)；缺血再灌注組(A0、B0)；缺血后處理組(A1、A2、A3、B1、B2、B3)；缺血再灌注組、缺血后處理組在超聲監(jiān)測下行單側精索不全結扎建立急性單側睪丸缺血模型,根據(jù)睪丸內血流信號分布分為輕度缺血組(A組)和中度缺血組(B組)。缺血再灌注組直接恢復血流再灌

2、注；缺血后處理組于恢復再灌注前實施3次短暫的再灌注/缺血(R/I)循環(huán),A1和B1、A2和B2、A3和B3,再灌注/缺血時間間隔分別為15s/15s、30s/30s、45s/45s。各組在術前、再灌注前及恢復灌注后3天均行超聲造影檢查,分析造影參數(shù)β、TTP、PBD、DT/2變化。恢復灌注后3天,觀測術側睪丸組織MDA、SOD、外周血睪酮含量及caspase-3、Bcl-2的蛋白表達,光鏡下觀察病理變化(HE染色)進行Johnsen’s

3、評分,Tunel法檢測細胞凋亡并計算凋亡指數(shù)(AI),電鏡下觀察超微結構變化。
　　 結果：與S組相比,再灌注前,A0、A1、A2、A3組造影曲線峰值均低平后移,B0、B1、B2、B3組則低平后移更明顯,A0、A1、A2、A3組兩兩比較以及B0、B1、B2、B3組兩兩比較各造影參數(shù)均無統(tǒng)計學差異(P>0.05)?；謴凸嘧?天后,與S組相比,A0、A1、A2、A3組造影曲線峰值升高前移,B0、B1、B2、B3組則升高前移更明顯,A

4、0、A1、A2、A3組兩兩比較以及B0、B1、B2、B3組兩兩比較各造影參數(shù)均無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。睪丸組織MDA含量隨缺血程度增加而升高,各組MDA含量相比較:A1、A2組MDA含量顯著低于A0組(P<0.05),A3組與A0組無統(tǒng)計學差異(P>0.05),A2組MDA含量顯著低于A1、A3組(P<0.05)；B2組顯著低于B0組和B3組(P<0.05),B1、B3組與B0組無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。睪丸組織SOD含量隨缺

5、血程度增加而降低,各組SOD含量相比較:A1、A2組顯著高于A0組(P<0.05),A3組與A0組無統(tǒng)計學差異(P>0.05),A2組顯著高于A3組(P<0.05):B1、B2組顯著高于B0組(P<0.05),B3組與B0組差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),B2組SOD含量顯著高于B3組(P<0.05)。外周血睪酮含量隨缺血程度增加而降低,各組睪酮含量相比較:A1、A2組顯著高于A0組和A3組(P<0.05),A3組與A0組以及A1組與

6、A2組無統(tǒng)計學差異(P>0.05)；B1、B2組顯著高于B0組(P<0.05),B3組與B0組無統(tǒng)計學差異(P>0.05),B2組顯著高于B1、B3組(P<0.05)。caspase-3蛋白表達隨缺血程度的增加而呈升高,各組caspase-3蛋白表達相比較:A1、A2組顯著低于A0組(P<0.05),A3組與A0組無統(tǒng)計學差異(P>0.05),A2組顯著低于A1、A3組(P<0.05)；B2組顯著低于B0組(P<0.05),B1、B3組

7、與B0組差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。Bcl-2蛋白表達隨缺血隨缺血程度加重而降低,各組Bcl-2蛋白表達組內相比較:A2組顯著高于A0、A1、A3組(P<0.05),但A0、A1、A3組兩兩相比較差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05),B0、B1、B2、B3組間無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。Johnsen's評分隨缺血程度增加而減少,各組Johnsen’s評分相比較:A2組顯著高于A0、A3組(P<0.05),A1、A3組與A0組無統(tǒng)

8、計學差異(P>0.05)；B0、B1、B2、B3組間無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。AI隨著缺血程度加重而升高,各組AI相比較:A1、A2組顯著低于A0組(P<0.05),A3組與A0組無統(tǒng)計學差異(P>0.05),A2組顯著低于A3組(P<0.05)；B2組顯著低于B0、B3組(P<0.05),B1、B3組與B0組差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。電鏡下,隨著缺血程度的增加,生精細胞層次紊亂加重,生精細胞和精子數(shù)量逐漸減少,膜性結構連續(xù)