CD44在前列腺癌細(xì)胞遷移、增殖中作用的分子生物學(xué)基礎(chǔ)的研究.pdf

1、目的:前列腺癌在歐美國(guó)家是最常見(jiàn)的男性惡性腫瘤,隨著人口老齡化及飲食結(jié)構(gòu)的改變,中國(guó)前列腺癌的發(fā)病率和死亡率呈迅速增長(zhǎng)的趨勢(shì).前列腺癌的發(fā)病是與種族、環(huán)境因素相關(guān)的多基因異常和動(dòng)態(tài)演進(jìn)的結(jié)果.前列腺癌骨轉(zhuǎn)移是預(yù)后不良的標(biāo)志,因此對(duì)腫瘤局部浸潤(rùn)和遠(yuǎn)隔轉(zhuǎn)移的分子機(jī)理研究正在成為腫瘤生物學(xué)研究的熱點(diǎn).方法:該研究采用多種分子生物學(xué)方法對(duì)CD44在前列腺癌細(xì)胞遷移、增殖中作用進(jìn)行了基本的探討.其中包括:1.使用不同的presenilin抑制劑觀

2、察其對(duì)前列腺癌PC-3細(xì)胞遷移和增殖表型的不同影響.2.觀察過(guò)量表達(dá)包含不同結(jié)構(gòu)域的CD44分子對(duì)前列腺癌PC-3細(xì)胞遷移和增殖表型的不同影響.3.通過(guò)細(xì)胞組分分析和共聚焦顯微鏡直接觀察的方法研究CD44-ICD釋放后的亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)定位.4.通過(guò)對(duì)常見(jiàn)轉(zhuǎn)錄因子報(bào)告基因和信號(hào)傳導(dǎo)通路的檢測(cè),研究釋放并轉(zhuǎn)移進(jìn)核后的CD44-ICD,可能的基因調(diào)控通路.5.通過(guò)RNA干涉和反義RNA技術(shù)消除CD44基因在前列腺癌PC-3細(xì)胞中的表達(dá),進(jìn)而考察下

3、調(diào)CD44表達(dá)對(duì)腫瘤惡性表型的逆轉(zhuǎn).另外,上述實(shí)驗(yàn)中使用明膠酶譜分析、"劃痕"法和Matrigel包被的Transwell法等檢測(cè)PC-3細(xì)胞的遷移表型;使用MTT法檢測(cè)細(xì)胞存活和生長(zhǎng),Tunel法檢測(cè)細(xì)胞的凋亡.結(jié)論:該研究表明:在PC-3細(xì)胞中CD44分子分別受MT1-MMP和Presenilin1/2的作用,最終導(dǎo)致CD44ICD從膜結(jié)合型CD44△E的水解釋放并轉(zhuǎn)移進(jìn)核,并可能通過(guò)調(diào)控NF-κB等轉(zhuǎn)錄因子,影響腫瘤細(xì)胞的惡性表型