CapG促進前列腺癌細胞增殖、遷移和侵襲的研究.pdf

1、前列腺癌(prostate cancer，PCa)是全球男性發(fā)病率最高的惡性腫瘤。我國前列腺癌發(fā)病率低于歐美國家，但是我國前列腺癌患者的生存率卻不容樂觀，五年生存率僅為53.8％，大多數(shù)患者在初診時就已經(jīng)出現(xiàn)遠處轉(zhuǎn)移。因此，對具有高轉(zhuǎn)移傾向的PCa患者的篩查和對已轉(zhuǎn)移的晚期前列腺癌患者的治療仍然是諸多挑戰(zhàn)之一。本文通過研究前列腺癌中CapG的表達及其對前列腺癌細胞功能的影響揭示兩者之間的關(guān)系。
　　本研究首先通過生物信息學(xué)挖掘出與

2、前列腺癌的發(fā)生和轉(zhuǎn)移具有密切關(guān)系的差異基因CapG。對標本進行檢測發(fā)現(xiàn)CapG在前列腺癌組織中陽性表達明顯高于良性前列腺增生組織。與患者臨床病理參數(shù)作相關(guān)性分析，發(fā)現(xiàn)CapG表達與患者年齡、吸煙史沒有相關(guān)性，而與PSA、G1eason評分、T分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均具有顯著的相關(guān)性。通過K-M生存曲線發(fā)現(xiàn)CapG陽性會影響患者無生化復(fù)發(fā)生存率。通過qRT-PCR、Western blotting對三株前列腺癌細胞株LNCap、PC3、DU14

3、5和一株正常前列腺細胞株P(guān)rEC進行了檢測，驗證了CapG在前列腺癌細胞株的表達與細胞的惡性程度及轉(zhuǎn)移能力相關(guān)，且均顯著性高于PrEC。構(gòu)建DU145-shCapG和對照組DU145-NC，LNCap-CapG和對照組LNCap-NC，通過qRT-PCR和Western blotting驗證Du45-NC和LNCap-CapG的CapG表達分別明顯高于DU145-shCapG和LNCap-NC。功能實驗結(jié)果顯示:1、增殖實驗:DU145

4、-NC較DU145-shCapG的細胞生長顯著加快;與LNCap-NC相比，LNCap-CapG細胞生長顯著加快。提示CapG可促進前列腺癌細胞體外增殖能力。2、周期、凋亡實驗:DU145-shCapG較DU145-NC細胞G1期顯著增多，S期、G2期顯著減少;LNCap-CapG較LNCap-NC細胞G1期顯著減少，S期、G2期顯著增多。DU145-shCapG較DU145-NC細胞凋亡數(shù)目顯著增加，LNCap-CapG較LNCap-

5、NC細胞凋亡數(shù)目顯著降低。提示CapG通過促進細胞周期和抑制凋亡促進細胞的增殖。3、裸鼠皮下成瘤實驗:DU145-NC成瘤體積顯著大于DU145-ShCapG，提示CapG促進前列腺癌細胞體內(nèi)的成瘤能力。4、劃痕實驗:DU145-NC相比，DU145-shCapG的遷移距離顯著減少;LNCap-CapG的細胞遷移距離較LNCap-NC顯著增加。表明CapG能夠促進前列腺癌細胞株的體外遷移能力。5、Transwell實驗:DU145-sh

6、CapG穿孔細胞數(shù)目顯著低于DU145-NC;LNCap-CapG穿孔細胞數(shù)目顯著高于LNCap-NC。說明CapG能夠促進前列腺癌細胞體外侵襲能力。6、EMT:檢測了前列腺癌細胞株中EMT相關(guān)分子標志物的mRNA以及蛋白質(zhì)的表達，DU145shCapG和LNCap-NC分別較對照組的E-cadherin表達升高，N-cadherin、vimentin、TWIST1的表達降低。提示CapG通過促進EMT過程增強前列腺癌細胞株的侵襲、遷移

7、能力。7、PI3K/AKT通路:檢測前列腺癌細胞株中AKT和p-AKT的表達，DU145-NC較DU145-shCapG和LNCap-NC分別較對照組的p-AKT表達明顯降低。兩組細胞中ATK無顯著性差異。推測CapG可能通過PI3K/AKT通路促進前列腺癌細胞株ENT過程。
　　通過生物信息學(xué)及實驗證實了與前列腺癌發(fā)生和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)的差異基因CapG。發(fā)現(xiàn)該基因與前列腺癌患者的臨床病理參數(shù)存在相關(guān)性，并且與患者的無生化復(fù)發(fā)生存率