人成骨肉瘤順鉑耐藥細胞系的建立及生物學特性研究.pdf

1、目的: 建立順鉑誘導的人成骨肉瘤多藥耐藥細胞系MG63/R并觀察其生物學特性。 方法: 以順鉑為誘導劑，采用大劑量沖擊與逐步增加劑量相結(jié)合的方法誘導人成骨肉瘤MG63細胞，建立多藥耐藥細胞系MG63/R。MTT法檢測藥物敏感性；光鏡、透射電鏡觀察MG63、MG63/R細胞形態(tài)及超微結(jié)構(gòu)變化；生長曲線、克隆形成試驗檢測細胞增殖能力；流式細胞術(shù)檢測細胞周期、凋亡指數(shù)、P-gp、Bcl-2、P53蛋白表達。 結(jié)果: 1)經(jīng)順鉑

2、186天的誘導建立了MG63/R，MG63/R對順鉑的耐藥指數(shù)為83.557，對阿霉素、長春新堿、氨甲蝶呤、環(huán)磷酰氨亦產(chǎn)生不同程度的交叉耐藥； 2)光鏡觀察可見：MG63/R細胞排列不規(guī)則，形態(tài)呈三角形、多角形及多核現(xiàn)象；透射電鏡顯示：MG63/R細胞表面突起增加，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)豐富； 3)細胞周期分析顯示MG63/R細胞G<，0>/G<,1>期86.8±11.6％，S期為11.7±2.5％；MG63細胞G<，0>/G<,1