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文檔簡介
1、目的:
探討PI3K抑制劑LY294002對骨肉瘤細胞U2OS和MG63增殖、凋亡、侵襲、遷移的影響及其作用的分子機制。
方法:
使用梯度濃度的LY294002對骨肉瘤細胞U2OS和MG63進行干預(yù),MTT檢測細胞在不同時間(24、48和72 h)的增殖情況,并分別測得兩細胞株處理24h后的半數(shù)抑制率時的藥物濃度(IC50值);流式細胞術(shù)檢測U2OS凋亡情況。在低于IC50濃度的情況下,劃痕愈合和trans
2、well侵襲實驗檢測細胞遷移、侵襲能力; RT-PCR和 Western blot檢測不同濃度的 LY294002對PI3K/AKT/FASN信號通路的影響。
結(jié)果:
?、倥c對照組相比,不同濃度的LY294002(5、10、20、40、80、160μM)對骨肉瘤細胞U2OS和MG63增殖均有抑制作用,并且隨著作用時間的延長,抑制率升高。此外,測得處理24h后的IC50值,U2OS細胞為62.98μM,MG63細胞為55
3、.2μM。
?、谂c對照組相比,不同濃度的LY294002(20、40、80、160μM)均可促進骨肉瘤細胞U2OS和MG63凋亡,且濃度越高,細胞凋亡率越高。
?、叟c對照組相比,不同濃度的LY294002(20、40μM)均可抑制骨肉瘤細胞U2OS和MG63侵襲和轉(zhuǎn)移,并且濃度越高其抑制作用越強。
?、躄Y294002抑制PI3K/AKT/FASN信號通路中各蛋白的表達和FASN轉(zhuǎn)錄水平(mRNA)的表達,并且隨
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