高劑量放療不同間隔時(shí)間的放射生物學(xué)基礎(chǔ)研究.pdf

1、目的： 從細(xì)胞和裸鼠動(dòng)物模型水平，研究比較不同時(shí)間間隔的相同大劑量X射線對(duì)人肺腺癌細(xì)胞系A(chǔ)nip973的影響，及其對(duì)肺癌細(xì)胞凋亡壞死的影響，推測(cè)這種放療模式的生物學(xué)機(jī)理。 方法： 1.培養(yǎng)建立人肺腺癌細(xì)胞系A(chǔ)nip973離體細(xì)胞系，醫(yī)用加速器6MV-X線行細(xì)胞兩次照射，每次照射20Gy，劑量率為400cGy/min，兩次照射間隔時(shí)間分別為24h、72h、168h。照射后光鏡、電鏡觀察24h后細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化；流式細(xì)

2、胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡；Comet分析定量檢測(cè)DNA損傷。 2.將培養(yǎng)的人肺腺癌細(xì)胞系A(chǔ)nip973接種于裸鼠皮下建立移植瘤模型。至移植瘤平均直徑達(dá)10mm左右時(shí)隨機(jī)分組固定，清醒狀態(tài)下進(jìn)行不同時(shí)間間隔(24h、72h、168h)的兩次照射，每次照射20Gy，劑量率為400cGy/min。照射后繼續(xù)飼養(yǎng)，觀察腫瘤體積變化，繪制腫瘤生長(zhǎng)曲線，計(jì)算腫瘤生長(zhǎng)延緩時(shí)間。 結(jié)果： 1、光鏡觀察形態(tài)學(xué)改變：與對(duì)照組相比，照射后各組

3、Anip973細(xì)胞體積增大，出現(xiàn)較明顯的分化。 2、電鏡觀察形態(tài)學(xué)改變：與對(duì)照組相比，照射后各組Anip973細(xì)胞細(xì)胞腫脹，細(xì)胞膜破裂，囊性細(xì)胞器擴(kuò)張，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)脫顆粒，線粒體腫脹，嵴少而短，呈現(xiàn)典型的細(xì)胞凋亡改變，并隨著間隔時(shí)間的延長(zhǎng)，結(jié)構(gòu)完整的細(xì)胞逐漸減少。 3、流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡：間隔168h組，與間隔24h組和間隔72h組相比，凋亡明顯減少，細(xì)胞存活率顯著減低，細(xì)胞多以脹亡形式死亡。 4、COMET分

4、析：Anip973細(xì)胞尾部DNA百分含量、尾長(zhǎng)、尾矩、Olive尾矩等指標(biāo)，與間隔時(shí)間呈現(xiàn)正相關(guān)性，隨著間隔時(shí)間的延長(zhǎng)，尾部DNA百分含量在總的彗星DNA中明顯升高，且DNA片段遷延長(zhǎng)度明顯增長(zhǎng)。 5、觀察腫瘤生長(zhǎng)延緩：照射后各組均表現(xiàn)出良好的生物學(xué)效應(yīng)，動(dòng)物瘤體表面皮膚反應(yīng)以濕性反應(yīng)為主，出現(xiàn)黃色滲液。間隔168h組腫瘤抑制率，生長(zhǎng)延緩明顯高于間隔24h組與間隔72h組，24h與72h組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論：