鹽酸文拉法辛膠囊在健康人體內(nèi)的藥代動力學及生物等效性研究.pdf

1、抑郁癥（Depression）是一種常見的情感障礙性精神疾病，其臨床表現(xiàn)為情緒低落、悲觀、睡眠障礙等，嚴重者常出現(xiàn)自殺沖動，是世界上最易致殘的疾病之一。世界衛(wèi)生組織（WHO）2005年統(tǒng)計，各種抑郁癥的患病率約占全球人口的11％。由此病所引起的醫(yī)療費用的巨大開支，對社會和家庭都是一種沉重的負擔，給患者肉體和精神上帶來了很大的痛苦。因此，抗抑郁癥藥物的研制成為世界制藥工業(yè)的一個熱點。鹽酸文拉法辛屬于新型抗抑郁藥，臨床上常用于難治性抑郁癥的

2、治療，它能夠同時有效的抑制5-羥色胺和去甲腎上腺素的再攝取。與其它抗抑郁藥相比，病人耐受性良好，而且較少產(chǎn)生三環(huán)類藥物嚴重的心血管毒性，以及單胺氧化酶抑制劑類嚴重的藥物相互作用，目前得到越來越廣泛的應用。根據(jù)我國藥品食品監(jiān)督管理局（SFDA）通過的《藥品注冊管理辦法》，鹽酸文拉法辛膠囊屬于六類藥，即仿制藥。對于此類藥，臨床試驗要求口服固體制劑應當進行生物等效性（BE）試驗，即指在相同實驗條件下給予相同劑量，其吸收速度與程度差異是否有統(tǒng)計

3、學意義。BE的研究反映了藥物制劑的生物學標準，對臨床療效提供直接的證明。
　　目的：
　　建立高效液相色譜法（HPLC）測定人血漿中鹽酸文拉法辛濃度的方法，探討其在健康人體內(nèi)的吸收、分布、代謝和排泄的動態(tài)變化特點。在此基礎上，以已上市的成都大西南制藥股份有限公司生產(chǎn)的博樂欣（鹽酸文拉法辛膠囊）為參比制劑，對四川禾正制藥有限責任公司仿制的鹽酸文拉法辛膠囊（受試制劑）進行人體生物等效性評價，為該藥申報提供臨床資料；同時，為指導該

4、藥的臨床安全、合理用藥提供理論依據(jù)，也為同類藥物研究提供參考。
　　方法：
　　本研究分兩部分：
　　第一部分HPLC法測定人血漿中鹽酸文拉法辛濃度的方法學建立。
　　色譜條件：色譜柱：Diamonsil C18（250mm×4.6mm，5μm）；流動相：乙腈-pH3.0磷酸鹽緩沖液-三乙胺（33.5:66.5:1，）（V/V/V）；流速：1.0mL·min-1；激發(fā)波長：276nm，發(fā)射波長：596nm；內(nèi)標：

5、馬普替林；柱溫為室溫；進樣量20μL。血漿樣品預處理方法：精取待測血漿樣品1.0mL于尖底10mL的具塞玻璃離心試管中，精密加入20μg·mL-1馬普替林儲備液20μL，然后精密加入0.1mol·L-1氫氧化鈉溶液0.2mL，混合后加入正己烷-異戊醇（98.5:1.5）的混合萃取液7mL，漩渦混合5min，離心5min（4,000r·min-1），取有機層，加0.05mol·L-1鹽酸溶液0.2mL，漩渦混合2min，離心5min（4,

6、000r·min-1）后，取水相20μL進樣到HPLC系統(tǒng)，進行血漿樣品文拉法辛濃度的測定。
　　第二部分研究鹽酸文拉法辛膠囊與博樂欣單劑量給藥在健康受試者體內(nèi)的藥代動力學及生物等效性。
　　本試驗采用標準二階段交叉設計自身對照試驗方法，選取18名健康男性志愿受試者，隨機分成兩組。試驗期間禁止劇烈活動，禁止吸煙、飲酒或含藥物、酒精的飲料等。試驗前18名受試者的血、尿常規(guī)、肝、腎功及心電圖檢查均正常，無神經(jīng)系統(tǒng)疾病及藥物過敏史

7、。按試驗方案設計要求，18名受試者于試驗前一天晚上19:00開始禁食，次晨采集服藥前靜脈血5mL，再分別單次口服受試制劑或參比制劑，于服藥后0.5、1、1.5、2、2.5、3、4、5、6、8、10、12、24、36h分別采取靜脈血5.0mL，離心分離出血漿置無菌試管中，于-20℃冷凍保存，待測。整個試驗期間配備經(jīng)驗的醫(yī)生、護士監(jiān)護。本試驗采用內(nèi)標法測定血漿樣品中鹽酸文拉法辛的濃度。Tmax、Cmax采用實測值，AUC用統(tǒng)計矩方法計算，將

8、血藥濃度時間數(shù)據(jù)經(jīng)DAS2.1.1藥代動力學統(tǒng)計軟件處理，計算其它主要藥動學參數(shù)。并利用DAS2.1.1統(tǒng)計軟件進行方差分析和雙單側t檢驗及（1-2α）％置信區(qū)間法分析受試制劑與參比制劑是否具有生物等效性。
　　結果：
　　1.本試驗條件下，HPLC的理論塔板數(shù)為4153，柱效良好。血漿中藥物和基線分離良好且選擇性高，在血漿濃度10～800ng·mL-1范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關系（r=0.999,n=6），標準曲線方程為Y

9、=0.0040X+0.0323。最低定量限（LOQ）為10ng·mL-1。血漿中高、中、低三個濃度的方法回收率分別為(98.7±9.9)％、(112.6±1.3)％、(99.9±1.2)％，提取回收率分別為(91.08±8.29)％、(81.51±7.77)％、(88.16±8.19)％；日內(nèi)RSD分別為11.6％、3.1％、1.1％，日間RSD分別為8.0％、9.3％、4.3％。凍融試驗在室溫24h內(nèi)和冰凍30d的RSD均小于10％。

10、
　　2.18名健康男性受試者單劑量口服鹽酸文拉法辛膠囊和博樂欣參比制劑100mg后，其主要藥動學參數(shù)分別為Tmax(3.11±0.93)h和(3.00±0.80)h；Cmax(273.38±75.44)ng·mL-1和(297.24±127.14)ng·mL-1；AUC（0-36h）(2237.54±816.67)ng·h·mL-1和(2413.92±1004.73)ng·h·mL-1；AUC（0-∞）(2456.13±838.

11、30)ng·h·mL-1和(2699.26±1115.72)ng·h·mL-1；t1/2Ke(6.57±2.81)h和(6.89±2.25)h。
　　3.將主要藥代動力學參數(shù)對數(shù)轉(zhuǎn)換后進行方差分析，結果顯示，兩種鹽酸文拉法辛膠囊制劑的AUC（0-36h）、AUC（0-∞）、Cmax和Tmax均無顯著性差異（P＞0.05），進一步采用雙單側t檢驗和（1-2α）％置信區(qū)間分析，AUC（0-36h）和Cmax均無顯著性差異（P＞0.05

12、），受試制劑AUC（0-36h）的90％置信區(qū)間為參比制劑相應參數(shù)的86.4～105.7％，Cmax的90％置信區(qū)間為參比制劑相應參數(shù)的80.7～114.2％。
　　4.所有受試者在整個實驗期間均未有任何不良反應主訴，實驗結束后重新進行體檢，所有體檢指標均正常。
　　結論：
　　1.本試驗建立的HPLC分析方法專屬性強、靈敏度高、準確性好。該方法具有操作簡便、快速、精密度和回收率高等特點，通過色譜圖分析，鹽酸文拉法辛周

13、圍無雜峰干擾且分離良好，所有效能指標均符合關于進行藥動學及生物等效性研究的試驗要求。
　　2.對受試鹽酸文拉法辛膠囊與參比制劑進行了人體生物等效性評價，考察了Cmax，Tmax，AUC0→36，AUC0→∞，t1/2等指標，獲得2000多個有效實驗數(shù)據(jù)。結論為：兩種制劑在健康人體內(nèi)具有生物等效性，相對生物利用度為95.6％。研究結果表明：兩種制劑體內(nèi)代謝相似，可在臨床上安全有效地使用。
　　3.藥代動力學研究結果闡明了文拉法