一種新型抗腫瘤藥物Copen的體內外藥效及藥代動力學研究.pdf

1、研究目的：
　　 研究Copen對不同組織來源的腫瘤細胞株體內外抗腫瘤作用，及大鼠灌胃/靜脈給藥后Copen的藥代動力學特征，從而為該藥的后續(xù)研究提供依據(jù)。
　　 研究方法：
　　 1.MTT法檢測Copen對不同腫瘤細胞株的增殖抑制作用；
　　 2.MTT法檢測Copen與紫杉醇、拓撲替康或順鉑合用后對不同腫瘤細胞株的增殖抑制作用；
　　 3.制備裸小鼠腫瘤模型，分組給藥后，測定瘤塊重量，計算相

2、對腫瘤體積(RTV)、相對腫瘤增值率(T/C)和腫瘤抑制百分率；
　　 4.建立大鼠血漿中Copen的LC-MS/MS測定方法，并驗證方法學；
　　 5.研究不同給藥方式及不同給藥劑量下，大鼠體內Copen的藥代動力學參數(shù)，并分析主要藥動學參數(shù)與劑量的相關性及性別差異。
　　 結果：
　　 1.Copen對不同組織類型的腫瘤細胞表現(xiàn)出不同程度的抑制作用，Copen作用72小時后的IC50值多數(shù)在300-1

3、000μM之間；與陽性藥物紫杉醇(Taxol)比較，Copen對檢測的14種不同的腫瘤細胞的抑制作用均弱于Taxol。Copen對人肺癌95-D細胞、人肝癌Bel-7402、人乳腺癌MDA-MB-231細胞、人前列腺癌PC-3細胞和人白血病HL-60細胞的增殖抑制作用比較明顯，IC50均小于500μM。
　　 2.Copen濃度為800μM、400μM時，與紫杉醇(18.25～600ng/mL)、拓撲替康(0.15625～5μm

4、ol/mL)合用72h后沒有明顯的協(xié)同作用；Copen濃度為800μM時，與順鉑(0.5、1.0、2.0μg/mL)合用72h后能顯著提高對HCT-116腫瘤細胞的抑制作用。
　　 3.Copen化合物在試驗劑量(25-100 mg/kg)下靜脈給藥對人肝癌SMMC-7721、Bel-7402、HepG2和人肺癌95-D裸小鼠移植瘤的生長無明顯抑制作用。但Copen100和50 mg/kg靜脈注射組對人結腸癌HCT-116裸小鼠

5、移植瘤有明顯抑制作用。
　　 4.研究建立的LC-MS/MS測定大鼠血漿中Copen方法特異性強，樣本處理方法操作簡便。為適合灌胃及靜脈注射給藥分別建立了兩條標準曲線，在0.05158～20.63μg·mL-1及1.01～504.76μg·mL-1范圍內呈線性，日內精密度和日間精密度RSD<11.3％，提取回收率均大于65％，方法學較好的滿足了生物樣本的分析要求。
　　 5.按25mg/kg、50mg/kg、100mg/

6、kg單次灌胃給藥后，大鼠體內Copen的主要藥代動力學數(shù)據(jù)t1/2(302.16±169.90)min、(243.80±112.71)min和(196.55±66.44)min，Cmax分別為(13.39±10.17)mg·L-1、(21.96±25.84)mg·L-1、和(28.35±10.24)mg·L-1，tmax分別為(10.00±3.69)min、(9.17±3.59)min和(14.17±24.01)min，AUC0-t分別

7、為(729.59±4337.80)mg·L-1·h、(1468.60±920.76)mg·L-1·h、和(5167.31±2842.48)mg·L-1·h。
　　 按25mg/kg、50mg/kg、100mg/kg單次靜脈給藥后，大鼠體內Copen的主要藥代動力學數(shù)據(jù)t1/2(296.49±571.77)min、(158.07±110.36)min和(229.05±260.11)min，Cmax分別為(339.34±290.40

8、)mg·L-1、(553.68±539.87)mg·L-1、和(1451.58±1108.34)mg·L-1，tmax分別為(15.00±17.06)min、(6.25±3.11)min和(6.67±3.26)min，AUC0-t分別為(24545.80±21102.82)mg·L-1·min、(54342.71±76451.41)mg·L-1·min、和(68653.62±37177.46)mg·L-1·min。
　　 統(tǒng)計分

9、析表明，在25～100mg/kg給藥范圍內單次灌胃/靜脈給藥后Copen的藥動學參數(shù)Cmax、AUC0-t與劑量之間呈正相關關系；在靜脈注射給藥組，雌雄大鼠單次靜脈給藥后Copen的主要藥代動力學參數(shù)Tmax，Cmax，AUC0-t，AUC0-∞，MRT0-t，MRT0-∞，CLz和t1/2Z性別差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。在灌胃給藥的25mg/kg、50mg/kg、100mg/kg三劑量組中，藥動學參數(shù)Cmax性別差異有統(tǒng)計學

10、意義(P<0.05)，而t1/2性別差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
　　 結論：
　　 1.Copen對人肺癌95-D細胞、人肝癌Bel-7402、人乳腺癌MDA-MB-231細胞、人前列腺癌PC-3細胞和人白血病HL-60細胞的有增殖抑制作用。
　　 2.Copen與Cis合用對人結腸癌HCT-116細胞的增殖抑制作用有明顯的提高。
　　 3.Copen100和50 mg/kg靜脈注射組對人結腸癌H