新型抗腫瘤候選化合物L(fēng)41大鼠體內(nèi)藥代動力學(xué)研究.pdf

1、腫瘤學(xué)研究表明，細胞周期失控是癌變的重要原因，在腫瘤細胞分化增殖信號通路中的許多關(guān)鍵酶現(xiàn)已成為藥物篩選的重要靶點，其中，細胞周期蛋白依賴性激酶(CDKs)抑制劑可有效阻滯腫瘤細胞周期，抑制腫瘤細胞增殖。目前，處于新藥開發(fā)后期和進入臨床研究的CDKs抑制劑已有近20種，具有廣闊的發(fā)展前景。
　　 抗腫瘤候選化合物L(fēng)41是由山東大學(xué)藥學(xué)院藥物化學(xué)研究所徐文方教授課題組首次合成的查爾酮類新型CDKs抑制劑，前期藥效學(xué)實驗證實，L41對

2、人結(jié)腸癌、肺癌、乳腺癌等細胞株的體外抗腫瘤活性以及抗荷肝癌H22小鼠血道轉(zhuǎn)移、裸鼠異植HCT116腫瘤生長抑制的體內(nèi)實驗中，均表現(xiàn)出高效低毒的抗腫瘤作用。L41作為新型抗腫瘤候選化合物在國家科技重大專項“十二五”計劃項目的支持下已進入新藥研發(fā)早期的臨床前藥代動力學(xué)研究階段。L41早期的藥代動力學(xué)研究是其系統(tǒng)成藥性研究的重要組成部分，本文旨在研究其臨床前藥代動力學(xué)性質(zhì)及代謝情況，以揭示L41在動物體內(nèi)的動態(tài)變化規(guī)律，為L41的進一步開發(fā)和

3、其他查爾酮類CDKs抑制劑的藥代動力學(xué)研究提供參考依據(jù)。
　　 1.本文建立了用于測定大鼠血漿中L41濃度的高效液相色譜分析方法;血漿樣品以液液萃取法提取L41與內(nèi)標(biāo)苯磺酸氨氯地平。色譜分析采用AgelaVenusilMP-ODS色譜柱(250mm×4.6mm(Ⅰ).D.5μm)，流動相為甲醇-50mM乙酸銨(77∶23，V/V)，流速為1mL/min，柱溫30℃，檢測波長343nm，進樣量20μL。方法學(xué)驗證結(jié)果顯示標(biāo)準(zhǔn)曲線在

4、15～1200ng/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)r為0.9990，定量下限為15ng/mL，該方法的批內(nèi)、批問精密度(RSD)均小于6％，準(zhǔn)確度的相對誤差(RE)在±9％以內(nèi)，可滿足體內(nèi)藥物分析的要求。
　　 2.該分析方法用于大鼠血漿中L41濃度的測定及藥代動力學(xué)研究。大鼠禁食12h后，分別單次灌胃（15，30和60mg/kg）和單次靜注(6mg/kg)給予L41，測定給藥后不同時間點血漿中L41的濃度，繪制血藥濃度-時間

5、曲線，采用DAS2.0軟件計算主要藥代動力學(xué)參數(shù)。結(jié)果表明，大鼠灌胃給藥后三個劑量組的Cmax，AUC0-∞與給藥劑量呈線性相關(guān)（r＞0.99，p＜0.05），其它藥代動力學(xué)參數(shù)(Tmax、t1/2、CL/F和V/F)均無顯著性差異(P＞0.05)。因此，在15～60mg/kg劑量范圍內(nèi)，L41在大鼠體內(nèi)呈現(xiàn)一級動力學(xué)過程。尾靜脈注給藥后，計算出L41的平均絕對生物利用度為32.8％，2509大鼠的CL為7.8mL/min，與大鼠的肝血

6、漿流量(13.8mL/min)接近，并遠小于大鼠的心輸出量(74mL/min)，說明肝首過效應(yīng)是L41口服絕對生物利用度的減少的主要原因。
　　 3.本文綜合利用液相色譜與離子阱、三重四級桿質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)研究了L41在大鼠體內(nèi)的代謝情況，在血漿與尿液中發(fā)現(xiàn)7個代謝產(chǎn)物。單次灌胃給予L41后，收集大鼠血漿與尿液樣本，用沉淀蛋白-冷凍分離-固相萃取法處理樣品，經(jīng)色譜分離后對代謝產(chǎn)物進行定性分析。所發(fā)現(xiàn)的7個代謝物情況如下:M5，M6為