廣西豬繁殖與呼吸綜合征病毒的分子生物學(xué)研究.pdf

1、近來,廣西一些養(yǎng)殖場(chǎng)頻繁發(fā)生以母豬流產(chǎn)、死胎、木乃伊、仔豬呼吸道癥狀等為特征的流行性傳染病,懷疑為豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)所致.該研究應(yīng)用針對(duì)PRRSV的N基因的特異性引物P1/P2,通過RT-PCR技術(shù)對(duì)從廣西南寧市郊區(qū)收集的仔豬病料進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果為陽性.將材料接種于易感細(xì)胞—Marc-145細(xì)胞,經(jīng)過6代盲傳,結(jié)果出現(xiàn)了典型的細(xì)胞病理變化(CPE),與對(duì)照株病變相似,經(jīng)鑒定為PRRSV,成功地分離出廣西第一株P(guān)RRSV毒

2、株,命名為GXA株,其毒價(jià)為10<'5.33>TCID<,50>/ml.參考VR-2332和CH-1a株基因序列,設(shè)計(jì)了3對(duì)引物E1/E2、M1/M2、N1/N2,分別擴(kuò)增GXA株的E、M、N基因.并進(jìn)行克隆和測(cè)序.結(jié)果分別擴(kuò)增出大小為668bp、582bp和443bp的目的片段.應(yīng)用DNAstar生物學(xué)軟件對(duì)所測(cè)得的序列進(jìn)行處理后,得到GXA株的E、M和N基因ORF全長分別為603nt、524nt和372nt,分別編碼200、1 74