玉米轉錄因子克隆及抗逆功能分析.pdf

1、干旱、高鹽、低溫等非生物逆境嚴重影響植物的生長發(fā)育和農(nóng)作物的產(chǎn)量。我國的農(nóng)業(yè)基礎薄弱，耕地有效灌溉面積不足47％，中低產(chǎn)田約占2/3，抗災能力較弱，干旱、低溫和土壤鹽漬化是影響我國農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的嚴重問題。玉米我國主要的糧食，并且其種植量在逐漸增加。所以運用現(xiàn)代的分子生物學技術，闡明植物抗逆機制，以獲得抗逆性優(yōu)良的轉基因玉米品種非常重要。
　　 目前已有人通過玉米全基因組序列分析和生物信息學計算，預測了玉米中所有編碼轉錄因子的基因，從

2、中排除掉與水稻、擬南芥(蛋白)同源性高于55％的基因，而獲得了玉米特異的轉錄因子庫。
　　 本論文通過克隆得到轉錄因子CDS序列，轉化擬南芥與玉米，獲得高表達與受抑制的轉化體，并分析激素處理與各種脅迫條件下的基因表達模式，從而研究其基因功能，為作物抗逆轉基因育種研究提供基因資源并奠定理論基礎。
　　 通過本論文的研究工作得到的主要結論如下：
　　 1.通過gateway系統(tǒng)將克隆出來的玉米轉錄因子的CDS序列克隆

3、到目的載體pGWEAR/pGWVP64。花序浸泡轉化，獲得轉基因擬南芥，農(nóng)桿菌侵染化，獲得轉基因玉米植株。
　　 2.對能克隆出來的轉錄因子進行亞細胞定位分析而得到zmtf04、zmtf10、zmtf25在細胞核中表達，為研究該轉錄因子的分子機制奠定了重要的基礎。當玉米齊319在蛭石培養(yǎng)至三葉一芯時，對其進行六種(H2O、NaCl、PEG、ABA、GA、SA)不同處理，六個(0.5h、1h、3h、6h、9h、24h)時間點并且地