定眩合劑對(duì)椎基底動(dòng)脈供應(yīng)血不足影響論文：定眩合劑對(duì)椎基底動(dòng)脈供應(yīng)血不足兔腦去甲腎上腺素、5-羥色胺含量

1、<p>　　定眩合劑對(duì)椎基底動(dòng)脈供應(yīng)血不足影響論文：定眩合劑對(duì)椎基底動(dòng)脈供應(yīng)血不足兔腦去甲腎上腺素、5-羥色胺含量及血液流變學(xué)的影響</p><p>　　【摘要】  　　目的觀察中藥定眩合劑（Dingxuanheji)對(duì)兔椎基底動(dòng)脈供血不足（VBI）腦組織去甲腎上腺素（NE），5-羥色胺（5-HT）含量及血液流變學(xué)的影響。方法選健康青紫蘭兔40只,隨機(jī)分為空白組，模型組，西比靈組，定眩合劑高、

2、低劑量組，每組8只，除空白組外其余各組高脂飼料喂養(yǎng)并注射硬化劑，7 d重復(fù)1次，6周后造模成功，再連續(xù)給相應(yīng)藥物4周后處死，進(jìn)行指標(biāo)測(cè)定。結(jié)果定眩合劑能使椎基底動(dòng)脈供血不足動(dòng)物腦組織NE，5-HT的含量增加，并使血液流變學(xué)主要指標(biāo)降低, 減少了血栓形成的可能。結(jié)論定眩合劑可提高NE，5-HT的含量，通過(guò)改善通氣狀況對(duì)VBI腦組織具有保護(hù)作用，并能有效改善血液流變學(xué),血液流變學(xué)水平的高低可反映椎基底動(dòng)脈供血不足病變的程度及治療效果。<

3、;/p><p>　　【關(guān)鍵詞】  定眩合劑； 椎-基底動(dòng)脈供血不足； 去甲腎上腺素； 5-羥色胺</p><p>　　Abstract：ObjectiveTo study effects of DXHJ on the NE,5-HT contents of Brain Tissue and blood rheology in Vertebro-basilar Artery insuf

4、ficiency model rabbits. Methods40 rabbits were randomly divided into 5 groups，normal group, model group, Flunarizine group and DXHJ high, low dose groups．Except normal group, the rest were fed by high fat diet, and injec

5、ted Yinghuaji once a week for six weeks. Ten weeks later, the rabbits were sacrificed and the chose targets were tested. ResultsThe DXHJ could rai</p><p>　　Key words： Dingxuanheji；  Vertebrobasilar insu

6、fficiency；   NE；  5-HT；    　　椎基底動(dòng)脈供血不足（VBI）是由于短暫性血液供應(yīng)不足導(dǎo)致腦干、小腦或枕葉皮層缺血的一組臨床綜合征，是神經(jīng)系統(tǒng)的常見(jiàn)病、多發(fā)病，其特點(diǎn)為反復(fù)發(fā)作,纏綿難愈,每年有10%的病人發(fā)生完全性腦卒中, 急性基底動(dòng)脈閉塞或急性雙側(cè)椎動(dòng)脈閉塞的死亡率則高達(dá)80% 以上。因此對(duì)VBI 進(jìn)行積極的治療, 無(wú)論在臨床上, 還是

7、在預(yù)防醫(yī)學(xué)上均有很大的意義。腦內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)是一類具有廣泛生物學(xué)活性的物質(zhì),在中樞神經(jīng)系統(tǒng)參與許多生理反應(yīng)。這些物質(zhì)在組織中的含量是反映神經(jīng)遞質(zhì)生物合成、釋放、攝取、失活等過(guò)程的生化指標(biāo)，在研究神經(jīng)元功能狀態(tài)或研究藥物對(duì)神經(jīng)組織作用的影響時(shí),常用這些生化指標(biāo)。近年來(lái)發(fā)現(xiàn),病理情況下它與腦血管病關(guān)系密切［1］，本研究主要觀察定眩合劑(DXHJ) 對(duì)椎基底動(dòng)脈供血不足腦組織中單胺類神經(jīng)遞質(zhì)去甲腎上腺素(NE) 、5-羥色胺(5-HT) 含

8、量的影響及其血液流變學(xué)的改變，探討DXHJ的作用機(jī)制。</p><p><b>　　1  材料與儀器</b></p><p>　　1.1  動(dòng)物健康青紫蘭兔40 只 , 雌雄各半, 體質(zhì)量( 2.0±0.3) kg, 兔齡3～4 月, 合格證號(hào)：醫(yī)動(dòng)字號(hào)14-004,由蘭州生物制品研究所實(shí)驗(yàn)動(dòng)物室提供，附合一級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。室溫18～

9、20℃,濕度65%～70%,實(shí)驗(yàn)前適應(yīng)性喂養(yǎng)3 d后隨機(jī)分為5組, 即空白組、模型組，西比靈組，定眩合劑高、低劑量組,每組8只。</p><p>　　1.2  藥物及試劑定眩合劑由甘肅省中醫(yī)院制劑室配制 (藥物組方：岷當(dāng)歸，川芎，半夏，天麻，白術(shù)，茯苓，陳皮，鉤藤，甘草) ； 西比靈由西安楊森制藥有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：20080109；消痔靈注射液由吉林省集安益盛藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：080321；

10、利多卡因，批號(hào)：0708022；膽固醇購(gòu)自北京雙旋生物培養(yǎng)基制品廠，批號(hào)：20070606。豬油，雞蛋，白糖，市售，自備。NE，5-HT試劑盒購(gòu)自美國(guó)ADL公司。</p><p>　　1.3  儀器經(jīng)顱多普勒血流檢測(cè)儀為美國(guó)卜ledasoraics TCD儀，探頭頻率2HzIz；日立高速低溫冷凍離心機(jī)；722 s分光光度計(jì)，上海緊密科學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品。</p><p><

11、b>　　2  方法</b></p><p>　　2.1  造模方法參照成都中醫(yī)藥大學(xué)鄭重等［2］的造模方法，用硬化劑（消痔靈與利多卡因按1∶1混合）10 ml，于家兔左側(cè)C3～C5頸椎橫突側(cè)面，進(jìn)針以感覺(jué)到橫突邊緣為準(zhǔn)，回抽針?biāo)o(wú)血、無(wú)氣、無(wú)腦脊液，然后推注硬化劑，于7 d后重復(fù)注射一次。同時(shí)除空白組外其余各組高脂飼料喂養(yǎng)（高脂飼料由2%膽固醇、5%鮮蛋黃、3%白糖、10%豬

12、油、80%基礎(chǔ)飼料配制而成）［3］。6周內(nèi)造模成功，以TCD檢驗(yàn)造模成功。</p><p>　　2.2  給藥方式將40只青紫蘭兔隨機(jī)分為5組，即空白組，模型組，西比靈組，定眩合劑高、低劑量組。西比靈組以西比靈1.2 mg/(kg·d)，并以每千克體重10 ml蒸餾水稀釋,制成混懸液灌胃；治療組分別予定眩合劑低、高劑量［3.6 ，7.2 ml/(kg·d)］灌胃（本品每毫升含天麻以天

13、麻素計(jì)，不得少于0.19 mg）；模型組同時(shí)灌胃以相應(yīng)體積的生理鹽水；空白組不予任何處理。此后，每周秤一次體重,根據(jù)體重調(diào)整給藥量。</p><p><b>　　2.3  指標(biāo)測(cè)定</b></p><p>　　2.3.1  腦組織單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的測(cè)定腦組織勻漿的制備：實(shí)驗(yàn)用家兔斷頭處死，迅速打開(kāi)顱腔，在冰浴中迅速分離大腦腦干，放于硫酸紙上稱重，將腦

14、組織放入裝有3 ml預(yù)冷生理鹽水中，退去紙重求得腦組織的凈量，按1∶30的比例補(bǔ)充生理鹽水量制成組織勻漿，將組織勻漿倒入帶塞離心管中，振蕩5 min，然后4℃在3 000 r·min-1離心15 min，取上清液，2～8℃冰柜保存酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定腦組織NE，5-HT含量。</p><p>　　2.3.2  血液流變學(xué)測(cè)定每組兔子在清醒狀態(tài)下，心臟穿刺取血, 肝素抗凝。將5 ml 血液放入毛管

15、式自動(dòng)顯示流變儀中操作, 觀察5組動(dòng)物全血粘度、血漿粘度與紅細(xì)胞壓積的變化。</p><p>　　2.4  統(tǒng)計(jì)學(xué)處理應(yīng)用SPSS 10.0軟件，實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)均以±s表示,各組間兩兩比較采用F檢驗(yàn)。</p><p><b>　　3  結(jié)果與分析</b></p><p>　　3.1  各組NE， 5-HT含

16、量的比較  結(jié)果見(jiàn)表1。 表1  定眩合劑對(duì)模型家兔NE，5-HT的影響（略）</p><p>　　3.2  各組血液流變學(xué)的比較結(jié)果見(jiàn)表2。表2  定眩合劑對(duì)模型家兔血液流變學(xué)全血黏度的影響（略）</p><p>　　表1結(jié)果表明，模型組腦組織內(nèi)NE、5-HT含量與空白組比較明顯降低（P<0.01）。應(yīng)用定眩合劑后，低劑量治療組兔腦組織內(nèi)NE

17、、5-HT含量無(wú)明顯變化（P>0.05），高劑量組與模型組比較差異有顯著性( P<0. 05， P<0.01)，隨著定眩合劑治療量的增加，高劑量組與小劑量組之間有差異（P<0.05），實(shí)驗(yàn)動(dòng)物腦內(nèi)NE，5-HT含量增高。    　　表2資料經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理表明：模型組與空白組比較差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01) ，提示模型組血黏度明顯高于正常組；西比靈組與模型組比

18、較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05) ，提示西比靈無(wú)降低血黏度作用；定眩合劑高劑量組與空白組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05) ，提示定眩合劑低、高劑量干預(yù)模型家兔后血黏度基本恢復(fù)至正常水平。</p><p><b>　　4  討論</b></p><p>　　4.1  定眩合劑對(duì)NE、5-HT含量的影響椎-基底動(dòng)脈的供血是腦部血液供應(yīng)

19、的重要系統(tǒng)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物腦組織單胺類神經(jīng)遞質(zhì)與VBI之間病理生理上的密切關(guān)系。腦內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)NE、5-HT 是由神經(jīng)細(xì)胞合成后儲(chǔ)存于囊泡內(nèi),當(dāng)動(dòng)作電位到達(dá)神經(jīng)末梢時(shí),在Ca2+ 的參與下通過(guò)酶解或再攝取被迅速清除。　Birthelmer等［4～6］ 認(rèn)為中樞神經(jīng)系統(tǒng)缺血期間可刺激腦內(nèi)單胺類遞質(zhì)如5-HT、NE等的大量釋放，這些遞質(zhì)又是Ca2+的激動(dòng)劑，可開(kāi)啟Ca2+通道閘門(mén)，使Ca2+大量流入胞內(nèi)，神經(jīng)元內(nèi)鈣超載；另一方

20、面，缺血前已合成的神經(jīng)遞質(zhì)大量釋放進(jìn)入細(xì)胞間隙, 細(xì)胞間隙蓄積的單胺類神經(jīng)遞質(zhì)在腦缺血過(guò)程中發(fā)揮更多的損傷作用，使神經(jīng)元破壞加劇，最后這些遞質(zhì)一部分被降解,一部分被帶入腦脊液及血液中,終使腦組織中遞質(zhì)含量下降。另有研究表明［7，8］ , 某些神經(jīng)元有單胺類介質(zhì)與肽類物質(zhì)共存, 在腦缺血后, 這兩類物質(zhì)的水平都發(fā)生了改變,β內(nèi)啡肽控制5-HT的含量, β內(nèi)啡肽減少時(shí), 5-HT水平就增高, β內(nèi)啡肽增高時(shí), 5-HT水平就減少, 5-HT

21、含量下降促使β內(nèi)啡肽釋放增加，從而引起通氣抑</p><p>　　4.2  定眩合劑對(duì)血夜流變學(xué)的影響椎基底動(dòng)脈供血不足的發(fā)病主要是血流動(dòng)力學(xué)改變所致,少數(shù)可能由微栓子引起,血液流變學(xué)與中醫(yī)血瘀的關(guān)系密切,血流流變學(xué)指標(biāo)反映血液的黏滯性、濃稠性、聚集性和凝固性，是血瘀證病理變化的重要參數(shù)。全血黏度主要由紅細(xì)胞和變性能力所決定,家兔的紅細(xì)胞與人相同，均為無(wú)核紅細(xì)胞,其聚集性與人相對(duì)接近, 當(dāng)血液黏滯度增高

22、、顯著的高黏狀態(tài),這勢(shì)必影響微循環(huán)的灌注; 全血黏度增高則血液流動(dòng)性差, 最終導(dǎo)致微循環(huán)障礙。當(dāng)歸及其水溶性成分阿魏酸能抑制血小板釋放5-HT ,后者是血小板聚集的促進(jìn)劑;阿魏酸也能提高血小板中環(huán)磷酸腺苷(cAMP) 濃度,抑制血栓素A2 ( TXA2 ) 的合成［13］；天麻的有效成分天麻素能抑制血小板粘附,阻止血栓形成。本實(shí)驗(yàn)較全面地反映了不同切變率下的全血黏度變化。與正常組比較,造模后模型組低、高切變率明顯增高,說(shuō)明本法造?？稍黾?/p>

23、家兔血液的黏滯性。定眩合劑對(duì)低、高切變率下的全血黏度有顯著降低作用,從一個(gè)側(cè)面證明了定眩合劑確有化瘀作用。根據(jù)本研究結(jié)果，定眩合劑可有效降低VBI家兔明顯升高的全血粘度，增加該模型家兔的腦血流量，降低血黏度。從本文資料分</p><p>　　【參考文獻(xiàn)】  　　［1］Milusheva E，Sperlagh B, Shikova L, et al. Nonsynaptic release of［ 3H

24、］ noradrenaline in response to oxidative stress combined with mitochondrial dysfunction in rat hippocampal slices［J］.Neuroscience,2003, 120 (3) : 771.　?。?］朱明雙，鄭重，黃勇，等.注射硬化劑法制作家兔頸椎病椎動(dòng)脈型模型［J］.成都中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2000，23（3）：43.