丹參愈傷組織誘導(dǎo)與有效成分含量的研究.pdf

1、本文以丹參為研究對(duì)象，采用組織培養(yǎng)手段，研究了外源激素、外植體、培養(yǎng)基pH值、營(yíng)養(yǎng)元素等因素對(duì)丹參愈傷組織的誘導(dǎo)和生長(zhǎng)、愈傷組織中丹酚酸B的含量以及愈傷組織的PAL活性等的影響，取得了以下研究結(jié)果： 1、以丹參(SalviamiltiorrhizaBunge)無(wú)菌苗的根、莖、真葉為外植體，接種于附加2,4-D、NAA、6-BA及其組合的MS固體培養(yǎng)基上，研究外源激素對(duì)丹參愈傷組織誘導(dǎo)和生長(zhǎng)的影響。結(jié)果表明：?jiǎn)为?dú)使用三種植物生長(zhǎng)調(diào)

2、節(jié)物質(zhì)在一定濃度范圍內(nèi)均誘導(dǎo)愈傷組織；配合使用外源生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素，能獲得出愈率高、生長(zhǎng)快、質(zhì)量好的愈傷組織；較佳組合的培養(yǎng)基為MS+2,4-D2.0mg/L+6-BA1.0mg/L和NAA1.0mg/L+2,4-D1.0mg/L+6-BA1.0mg/L；低濃度的2,4-D對(duì)丹參愈傷組織的誘導(dǎo)有促進(jìn)作用，但2,4-D濃度過(guò)高時(shí)對(duì)愈傷組織的生長(zhǎng)有抑制作用。 2、以丹參(S.miltiorrhizaBunge)無(wú)菌苗的真葉、莖、根

3、為外植體，接種于附加NAA1.0mg/L+2,4-D1.0mg/L+6-BA1.0mg/L的MS固體培養(yǎng)基上，研究不同外植體對(duì)愈傷組織及有效成分含量的影響。結(jié)果表明：不同的外植體誘導(dǎo)愈傷組織的效果不同。葉和莖的愈傷組織出愈率高，長(zhǎng)勢(shì)好且生長(zhǎng)快，根的愈傷組織出愈率低且生長(zhǎng)慢。葉和莖均是誘導(dǎo)愈傷組織的較佳外植體。莖的愈傷組織中丹酚酸B和丹參酮ⅡA的含量較高，隱丹參酮含量低。根的愈傷組織中丹參酮ⅡA和隱丹參酮含量較高，丹酚酸B含量較低。

4、 3、以丹參(S.miltiorrhizaBunge)無(wú)菌苗的真葉為外植體，接種子附加NAA1.0mg/L+2，4-D1.0mg/L+6-BA1.0mg/L的MS固體培養(yǎng)基上，研究培養(yǎng)基pH值對(duì)丹參愈傷組織及有效成分含量的影響。結(jié)果表明，培養(yǎng)基pH值為5.8～7.0時(shí)均能誘導(dǎo)丹參葉產(chǎn)生愈傷組織。培養(yǎng)基pH5.8時(shí)愈傷組織生長(zhǎng)最好，出愈率高，隨著pH增大，愈傷組織變得堅(jiān)硬，且顏色逐漸加深，生長(zhǎng)嚴(yán)重受阻。 培養(yǎng)基pH5.8時(shí)愈傷組

5、織中有效成分丹酚酸B的含量較低，PAL活性也較低。pH6.2～6.4時(shí)PAL活性最高，丹酚酸B含量也最高。適宜于丹酚酸B積累的pH值環(huán)境為pH6.2～6.4。 4、以丹參(S.miltiorrhizaBunge)無(wú)菌苗的真葉為外植體，以MS+NAA1.0mg/L+2,4-D1.0mg/L+6-BA1.0mg/L為基本培養(yǎng)基，研究了6種營(yíng)養(yǎng)元素對(duì)丹參愈傷組織生長(zhǎng)、愈傷組織中丹酚酸B含量以及PAL活性的影響。結(jié)果表明：營(yíng)養(yǎng)元素和有機(jī)

6、元素的種類和濃度對(duì)愈傷組織的生長(zhǎng)、愈傷組織中PAL活性和丹酚酸B含量均有不同程度的影響。營(yíng)養(yǎng)元素中氮源、KH2PO4和MgSO4是影響愈傷組織誘導(dǎo)和生長(zhǎng)的關(guān)鍵因素，VB1是誘導(dǎo)愈傷組織的重要因素，CaCl2對(duì)愈傷組織的誘導(dǎo)和生長(zhǎng)影響不明顯。 適宜于丹參愈傷組織誘導(dǎo)和生長(zhǎng)的較佳的氮源濃度為120mM，KH2PO4為0.5～1.0mM，MgSO4為1.5～2.5mM，CaCl2為1.5～2.0mM，VB1為5.0mM。 6種