葡萄汁有孢漢遜酵母結(jié)合卵磷脂對(duì)柑橘采后綠霉病的生物防治及其機(jī)制研究.pdf

1、柑橘是全球最重要的水果之一，在世界各地深受歡迎。據(jù)報(bào)道，柑橘在其采后貯運(yùn)期間，因病原菌侵染產(chǎn)生的采后病害造成極大經(jīng)濟(jì)損失。目前，柑橘采后病害的防治主要依靠化學(xué)藥劑。但長(zhǎng)期使用化學(xué)殺菌劑會(huì)使病原菌產(chǎn)生抗藥性從而降低防治效果。此外,殺菌劑的濫用所造成的環(huán)境污染和健康問(wèn)題已經(jīng)引起全球的關(guān)注。因此，人們需要尋找一種安全有效的新型柑橘采后病害防治方法。
　　近年來(lái)，生物防治控制果蔬采后病害被證明是一種行之有效的方法。很多拮抗酵母菌被報(bào)道可以

2、顯著抑制柑橘采后病害的發(fā)生。但目前在半商業(yè)化條件下酵母菌往往不如殺菌劑的效果好。因此，本課題的研究重點(diǎn)是篩選出具有高效拮抗效果的酵母菌，并將其和卵磷脂聯(lián)合使用以提高酵母菌對(duì)柑橘采后綠霉病的拮抗效力。
　　本論文的主要研究?jī)?nèi)容有：（1）篩選到生防效果優(yōu)良的酵母菌種；（2）卵磷脂結(jié)合拮抗酵母對(duì)柑橘采后綠霉病的控制效力測(cè)定；（3）卵磷脂結(jié)合葡萄汁有孢漢遜酵母誘導(dǎo)柑橘產(chǎn)生抗病性的可能機(jī)制研究。主要試驗(yàn)結(jié)果如下：
　　（1）經(jīng)離體及活

3、體篩選，最終得到拮抗酵母菌Y1，Y2，Y3和Y4在果實(shí)試驗(yàn)中對(duì)柑橘指狀青霉菌（Penicillium digitatum）表現(xiàn)出較好的抑菌效果，其中Y3菌株效果最好。對(duì)Y1，Y2，Y3和Y4四株菌株進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察和分子基因序列的鑒定，鑒定Y1為Issatchenkia hanoiensis，Y2為Candidazemplinina，Y3為Hanseniaspora uvarum，Y4為Pichia manshurica。目前，拮抗酵母菌

4、Y3在柑橘采后病害生物防治中的應(yīng)用尚未見(jiàn)報(bào)道。
　?。?）H. uvarum在濃度為1×106、1×107、1×108和1×109（cells/mL）條件下都顯著地降低了果實(shí)的腐爛率和腐爛直徑，且酵母濃度越高,效果越好。不同濃度卵磷脂結(jié)合處理能提高拮抗酵母H. uvarum對(duì)柑橘綠霉病的拮抗效果，且卵磷脂濃度為1.5％w/v時(shí)，拮抗效果最好,其腐爛率和腐爛直徑分別降低了93.5%和5.6 mm。觀察結(jié)果表明，卵磷脂（1.5% w/

5、v）提高了葡萄汁有孢漢遜酵母在柑橘傷口處的生長(zhǎng)動(dòng)態(tài)。與對(duì)照組相比，H. uvarum單獨(dú)處理顯著降低了柑橘采后自然腐爛率，H. uvarum與卵磷脂（1.5% w/v）結(jié)合使用顯著增強(qiáng)了拮抗酵母對(duì)柑橘采后自然腐爛率的抑制作用。各處理沒(méi)有對(duì)柑橘的貯藏品質(zhì)造成顯著的不利影響，且結(jié)合處理顯著降低了柑橘采后失重率。
　?。?）H. uvarum結(jié)合卵磷脂防治柑橘采后綠霉病可能的生理機(jī)制包括：促進(jìn)酵母菌在果實(shí)傷口處的生長(zhǎng)，與病原菌的營(yíng)養(yǎng)和空