膜醭畢赤酵母對(duì)楊梅果實(shí)采后綠霉病的抑制作用研究.pdf

1、楊梅為中國(guó)亞熱帶特色水果,果實(shí)色澤鮮艷、風(fēng)味濃郁、且富含人體必需的多種維生素和礦物質(zhì)以及其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),深受廣大消費(fèi)者喜愛(ài).但楊梅果實(shí)采收于初夏高溫多雨季節(jié),采后呼吸作用旺盛,且果實(shí)組織嬌嫩,含水量高,無(wú)外果皮保護(hù),極易受機(jī)械損傷和病原菌侵染,常溫貨架期極短。由桔青霉(Penicillium citrinum Thom)引起的綠霉病是楊梅果實(shí)采后主要的真菌性病害?；瘜W(xué)殺菌劑可有效降低楊梅果實(shí)采后綠霉病的發(fā)病率,但由于公眾對(duì)農(nóng)藥殘留和病菌耐

2、藥性的擔(dān)憂,化學(xué)殺菌劑的應(yīng)用日益受到限制,這迫使人們尋求安全高效的楊梅防腐保鮮新方法。本論文以“烏種”果實(shí)(Myrica rubra sieb.et Zucc.Cv.Wumei)為試材,研究了膜醭畢赤酵母(P.membranaefaciens)處理對(duì)楊梅果實(shí)采后綠霉病的抑制效果及其內(nèi)在機(jī)理,在此基礎(chǔ)上探索了Harpin蛋白提高P.membranaefaciens拮抗效力的效果,以期為楊梅果實(shí)保鮮新技術(shù)的開(kāi)發(fā)提供依據(jù)。研究結(jié)果分述如下:<

3、br>　　 (1)P.membranefaciens酵母菌懸液處理顯著減少了采后楊梅果實(shí)由P.citrinum引起的楊梅果實(shí)采后綠霉病發(fā)病率。并且在1×106CFU/ml至1×109CFU/ml的濃度范圍內(nèi),隨著P.membranefaciens處理濃度的增加,果實(shí)綠霉病發(fā)病率逐漸降低。P.membranefaciens的濾液和熱殺死液對(duì)果實(shí)致病菌沒(méi)有抑制作用；1×109CFU/ml的P.membranefaciens培養(yǎng)原液能抑制楊

4、梅綠霉病的發(fā)生,但其拮抗效果卻明顯弱于同濃度的酵母菌懸液.P.membranefaciens在1℃或20℃貯藏的楊梅果實(shí)傷口處迅速增值,說(shuō)明該酵母較能適應(yīng)楊梅傷口環(huán)境,可以充分與病原菌競(jìng)爭(zhēng)空間與營(yíng)養(yǎng),這也是P.membranefaciens抑制楊梅采后腐爛的主要機(jī)理。另外,1×109 CFU/mL的P.membranefaciens酵母菌懸液處理顯著減少了楊梅果實(shí)在貨架貯藏后的自然腐爛率,維持了果實(shí)品質(zhì),說(shuō)明該酵母具有一定的商業(yè)前景。<

5、br>　　 (2)為研究Pichia membranaefaciens對(duì)楊梅果實(shí)綠霉病的抑制作用及其機(jī)理,將楊梅果實(shí)先接種15μL濃度為1×109 CFU/mL的膜醭畢赤酵母菌懸液,風(fēng)干1 h后再接種15μL的1×105個(gè)/mL的P.citrinum孢子懸浮液,然后轉(zhuǎn)入1℃下貯藏8天,每隔2天測(cè)定果實(shí)腐爛率、病斑直徑、抗病相關(guān)酶幾丁質(zhì)酶、β-1,3-葡聚糖酶、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、過(guò)氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)活性以及

6、總酚含量；同時(shí)分析了離體條件下P.membranaefaciens對(duì)P.citrinum孢子萌發(fā)和芽管伸長(zhǎng)的影響。結(jié)果顯示,P.membranaefaciens可顯著抑制果實(shí)貯藏期間綠霉病的發(fā)生,并可誘導(dǎo)幾丁質(zhì)酶、β-1,3-葡聚糖酶、PAL、POD和PPO活性和總酚含量的升高；同時(shí)P.membranaefaciens在離體條件下也明顯病原菌的生長(zhǎng)。因此,P.membranaefaciens抑制楊梅果實(shí)采后腐爛與直接抑制病原菌生長(zhǎng)以及間

7、接誘導(dǎo)抗病性密切相關(guān)。
　　 (3)90mg/LHarpin復(fù)合1×109CFU/ml P.Membranefaciens酵母菌懸液處理能顯著提高P.membranefaciens對(duì)P.citrinum的生防效力。同時(shí)我們也發(fā)現(xiàn)90mg/LHarpin蛋白在體外和體內(nèi)都不能夠直接促進(jìn)P.membranefaciens的生長(zhǎng),而且不具有直接的抑菌效果,但Harpin可以顯著的誘導(dǎo)楊梅果實(shí)抗病相關(guān)酶活性的提高和總酚含量的上升從而提高