熒光標(biāo)記免疫層析試紙條的研制.pdf

1、本論文選擇沙丁胺醇作為目標(biāo)檢測(cè)物，選擇量子點(diǎn)和上轉(zhuǎn)換熒光納米顆粒作為標(biāo)記物，研究建立了兩種熒光標(biāo)記免疫層析試紙條分析方法，并將其應(yīng)用到動(dòng)物源性食品中的沙丁胺醇?xì)埩魴z測(cè)。
　　利用Protein A-Sepharose4B對(duì)沙丁胺醇多克隆抗體進(jìn)行純化，得到抗體濃度為2.77 mg mL-1的抗體。
　　利用活化酯法將抗體與羧基化的景子點(diǎn)(CdTe-COOH-PEG)偶聯(lián)，量子點(diǎn)∶抗體∶1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亞胺

2、(EDC)最佳的反應(yīng)比為1∶10∶3000（摩爾比），利用尺寸排阻柱對(duì)反應(yīng)后的偶聯(lián)物進(jìn)行純化，去除未反應(yīng)的量子點(diǎn)和抗體，得到純凈的抗體量子點(diǎn)復(fù)合物。最優(yōu)反應(yīng)液pH值為8.3、連接時(shí)間為3h、樣品稀釋液為磷酸緩沖液(PB)、抗體量子點(diǎn)復(fù)合物的添加量為2μL、工作液的添加量為10μL、二抗及包被原的稀釋倍數(shù)分別為100倍和18倍、選擇HF135s型號(hào)的NC膜、樣品墊采用0.5％ BSA處理，在最優(yōu)條件下組裝試紙條，利用濕法加樣，其方法檢出限

3、為2.0μg L1。選擇豬肉、牛肉、羊肉、豬肝、豬腎和雞肉六種動(dòng)物源性食品樣品，確定食品樣品前處理方法，食品樣品檢出限為10μg kg-1。
　　利用水熱法合成了疏水性、粒徑均勻的上轉(zhuǎn)換材料NaYF4∶Er3+，Yb3+(OA-UCNPs)，利用聚丙烯酸(PAA)通過配體交換途徑在高溫下對(duì)OA-UCNPs進(jìn)行了表面羧基修飾，形成了水溶性的PAA-UCNPs。利用活化酯方法進(jìn)行抗體與水溶性上轉(zhuǎn)換材料的偶聯(lián)。連接材料的最佳抗體量為0.

4、5 mg/5 mg（抗體材料質(zhì)量比）、二抗和包被原的稀釋倍數(shù)分別為10倍和18倍、抗體材料復(fù)合物的添加量為10μL、樣品稀釋液為磷酸緩沖液、工作液的添加量為10μL。在最優(yōu)條件下組裝試紙條，利用濕法加樣，其方法檢出限為5.0μg L-1。選擇豬肉、牛肉、羊肉、豬肝和豬腎五種動(dòng)物源性食品樣品，確定食品樣品前處理方法，食品樣品檢出限為25μg kg-1。
　　本文所建立的兩種檢測(cè)獸藥沙丁胺醇熒光標(biāo)記免疫層析試紙條分析方法具有靈敏度高、